念珠菌顯色培養基根據酶底物法,通過顯色來區別不同念珠菌,25-30℃培養48小時後,白色念珠菌顯綠色,熱帶念珠菌顯藍灰色,光滑念珠菌顯淡紫色至紫色,克柔假絲酵母菌顯紫粉色,其它念珠菌顯白色,細菌被抑製。
成份(g/L)
腖
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10.2
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氫罌素
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0.2
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色素
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22.0
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瓊脂
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15.0
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pH 6.3±0.2 25℃
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此配方可以進行改良或增加營養成份以獲得最佳的結果。
用法
稱取本品 9.7g(可按4.85g/100ml的比例擴大或縮小),加入200ml 蒸餾水或純化水中,加熱溶解並不停攪拌,煮沸不要超過1分鍾。將加熱後的培養基水浴冷卻至45-50℃,輕輕地搖勻,傾入無菌平皿(9cm的15ml/皿,7cm的10ml/皿),瓊脂完全凝固後,在超淨工作台中開蓋吹15-30分鍾,備用。
注:培養基中含少量氯化鎂,滅菌後可能出現微量沉澱。
操作步驟
1、按國家標準、SN 標準、FDA 標準或其它方法製備樣品液;
2、取樣品液塗布或劃線接種於平板上;
3、25-30℃培養48小時。白色念珠菌典型特征為綠色,熱帶念珠菌顯藍灰色,光滑念珠菌顯淡紫色至紫色,克柔假絲酵母菌顯紫粉色,其它念珠菌顯白色,細菌被抑製。
4、對可疑白色念珠菌菌落可劃線接種到PDA瓊脂平板上,25-30°C培養24- -48小時,挑取單菌落做鏡檢和生化試驗。
質量控製
1、外觀
此幹燥培養基的粉末均勻,具有良好的流動性,呈淡黃色。製備好的平板呈淡黃色透明固態。
2、微生物試驗
在 25-30℃ 培養 48 小時:
質控菌株
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ATCC
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生長情況
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菌落顏色
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白色念珠菌
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CMCC98001
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+++
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綠色
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熱帶念珠菌
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ATCC13803
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+++
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藍灰色
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克柔假絲酵母菌
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ATCC14243
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+++
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紫紅色
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光滑念珠菌
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ATCC15126
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+++
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淡紫色-紫色
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其它念珠菌
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/
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+++
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白色
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大腸埃希氏菌
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CMCC44102
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-
|
-
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方法的局限性
本培養基鑒定白色念珠菌,少數情況下可能會出現假陽性或假陰性,需做其它補充試驗。
典型特征
白色念珠菌典型特征為綠色,熱帶念珠菌顯藍灰色,光滑念珠菌顯淡紫色至紫色,克柔假絲酵母菌顯紫粉色,其它念珠菌顯白色,細菌被抑製。
貯存
製備好的平板應立即使用,應避免光線直接照射。幹粉培養基應放置於陰暗幹燥處, 保存溫度 2-8℃,注意避光保存。
失效
幹燥培養基超過保質期、結塊和顏色變化都不能使用。
注意
此培養基僅供實驗室使用。
參考文獻
1.Mega et al (J. Biochem. vol. 71, pp 107-114, 1972).
2.Bendel et al. XP-002064132 "Distinct Mechanisms of Epithelial Adhesion for Candida albicans and Candida tropicalis" vol. 92, Oct. 1993, pp. 1840-1849.
3.Mira-Gutierrez et al., XP-002064133 "Identification of yeasts by hydrolysis of amides" Nov. 8, 1994, pp. 101-106. Crist, Jr. et al., XP-002064134 "Comparison of the MUREX C. Albicans, Albicans/Sure, and Bacticard Candida Test Kits with the Germ Tube Test for Presumptive identification of Candida albicans" vol. 36, Jul. 5, 1996, pp. 2616-2618.
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念珠菌顯色培養基(1000ml)微生物靈敏度試驗:
按標簽用法製備培養基,接種以下質控菌株,放置25-30℃需氧培養48-72小時。
注:回收率計算時,用SDA瓊脂做對照培養基。
相關資料:
操作視頻|培養基的加熱滅菌操作(以XLD 、SC為例)-點擊查看實驗操作視頻
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