用途:用於純化水中菌落總數的測定,(EP、USP、Chp標準)
配方:
酵母浸出粉
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0.5
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蛋白腖
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0.5
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酪蛋白水解物
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0.5
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葡萄糖
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0.5
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可溶性澱粉
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0.5
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磷酸氫二鉀
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0.3
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無水硫酸鎂
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0.024
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丙酮酸鈉
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0.3
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瓊脂
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15.0
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pH值7.2 ± 0.2
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25℃
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用法:將本品完整包裝放置於100℃沸水中水浴20min~30min,待培養基完全溶解後冷卻至45℃~50℃時,搖勻,備用。
儲存條件及有效期
1.2-25℃保存。
2.本產品在儲存條件下有效期為六個月。
使用方法
將本品完整包裝放置於100℃沸水浴中加熱20-30min,待培養基至培養基完全溶解後冷卻至45℃~50℃時,撕開外層包裝,在無菌環境中擰開蓋子,將培養基傾入無菌平皿中,凝固後備用。
注意事項
1.若出現汙染、破損、變色、泄露等現象時,則不能使用。
2.水浴加熱過程中無需打開外層包裝,產品內部有少量氣體受熱後出現膨脹為正常現象。
3.使用後的培養基應進行消毒處理。
4.本產品使用方法非強製性,如用戶有具體參考資料可進行相應調整。
檢驗原理:
酵母浸出粉、蛋白腖、酸蛋白水解物提供氮源、維生素、生長因子;葡萄糖、為可發酵糖類;可溶性澱粉可以吸收菌在複蘇過程產生的有害物質;丙酮酸鈉可增強細菌的複蘇。磷酸氫二鉀為酸堿緩衝劑;無水硫酸鎂提供二價陽離子;瓊脂為凝固劑。
不同藥典關於純化水的微生物檢測方法和質量標準
中國藥典
【檢查】 微生物限度 取本品不少於 1ml,按薄膜過濾法處理後,采用 R2A 瓊脂培養基,30~35℃培養不少於 5 天,依法檢查(通則 1105),每1ml 供試品中需氧菌總數不得過 100cfu。
操作簡述:
除葡萄糖、瓊脂外,取上述成分,混合,微溫溶解,調節 pH 值使加熱後在 25℃的 pH值為 7.2±0.2,加入瓊脂,加熱溶化後,再加入葡萄糖,搖勻,分裝,滅菌。 R2A 瓊脂培養基適用性檢查試驗 照通則 1105 中“計數培養基適用性檢查”的胰酪大豆腖瓊脂培養基的適用性檢查方法進行,試驗菌株為銅綠假單胞菌和枯草芽孢杆菌。應符合規定。
USP標準
在美國藥典中,推薦使用0.45μm薄膜過濾法,並同時使用高營養培養基(平板計數瓊脂培養基(PCA))於30-35℃培養72小時以上,和低營養培養基(R2A瓊脂)於20-25℃培養96小時以上。檢測標準為:≤100cfu/ml 。
操作簡述:(可根據實際情況調整)
量取10ml充分混勻的水樣,以無菌操作加入安裝好的薄膜過濾器內,過濾。並用 pH7.0的無菌氯化鈉-蛋白腖緩衝液衝洗濾膜,每張濾膜每次衝洗量為100ml,共衝洗1次。過濾後,取出濾膜,正麵朝上貼於瓊脂平板上。共製備 2張濾膜,一張濾膜貼於平板計數瓊脂培養基平板(高營養培養基)置30℃~35℃生化培養箱中倒置培養2~3天,計數。另一張濾膜貼於R2A瓊脂平板(低營養培奍基),置20℃~25℃生化培養箱倒置培養5~7天,計數。以培養基平板上菌落數生長較多者作為檢測結果, 按比例折算為1ml純化水中的微生物數量後報告。
EP標準
在歐洲藥典中使用薄膜過濾法(0.45μm 孔徑濾膜),使用 R2A 瓊脂培養基在 30℃~35℃培養 5 天以上。 質量標準:≤100cfu/mL。
操作簡述:(可根據實際情況訓整)
量取 10ml 充分混勻的水樣,以無菌操作加入 安裝好的薄膜過濾器內,過濾。並用 pH7.0 的無菌氯化鈉-蛋白腖緩衝液衝洗濾膜,每張濾膜 每次衝洗量為 100ml,共衝洗 1 次。過濾後,取出濾膜,正麵朝上貼於 R2A 瓊脂平板上, 置 30℃~35℃生化培養箱中倒置培養 5 天,計數。按比例折算為 1ml 純化水中的微生物數量後 報告。
微生物靈敏度試驗:
按標簽用法製備培養基,接種以下質控菌株,放置30-35℃需氧培養18-120小時。
相關資料:
操作視頻|袋裝即用型瓊脂培養基使用方法-點擊查看實驗操作視頻
R2A瓊脂培養基的原理及應用 點擊查看