試劑盒組成:
組成
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別名
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規格
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配製依據
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溶液A
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對甲基苯磺酸溶液
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5ml*2
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在1000mL 5mol/L乙酸中溶解8g對氨基苯磺酸
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溶液B
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α-萘酚乙酸溶液
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5ml*2
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在1000mL 5mol/L乙酸中溶解5g α-萘酚
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反應原理:
蛋白腖和牛肉粉提供碳源、氮源、維生素和生長因子;某些細菌可利用硝酸鹽產亞硝酸鹽、氨或氮氣。滴加硝酸鹽還原試劑後若試驗菌培養物中有亞硝酸鹽,可與乙酸、對苯氨基苯磺酸和α-萘酚反應生成紅色的N-α-苯胺偶氮苯磺酸。若試驗菌可利用硝酸鹽產亞硝酸鹽進一步轉化為氮氣,則小倒管中會有氣體囤積,判定為陽性。若試驗菌可將亞硝酸鹽轉化為氨,則滴加硝酸鹽還原試劑呈無色反應,此時需加入適量鋅粉證明培養物中是否有未被利用的硝酸鹽存在,若加入鋅粉後為無色則證明無硝酸鹽,則可判斷為陽性。試驗菌不利用硝酸鹽,滴加硝酸鹽還原試劑後為無色,加入鋅粉後變為紅色,證明培養物中有未被利用的硝酸鹽被鋅粉還原為亞硝酸鹽產生紅色反應,此時判斷為陰性。
操作步驟:
1.培養物接種於硝酸鹽肉湯,36±1℃培養1-5天。
2.加入溶液A和溶液B各2-3滴,混勻。
3.立即觀察結果,也可以放置室溫2-5分鍾觀察結果。
結果判斷:
陽性反應:紅色。
陰性反應:不變色(無紅色出現)
注:如出現陰性結果,可再加入鋅粉少許,若出現紅色,則鑒定為陰性結果,若不變色則為陽性結果。
硝酸鹽還原試劑盒微生物靈敏度試驗:
按標簽用法製備培養基,接種以下質控菌株,放置/℃/培養/小時。
相關資料:
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