一、培養基的簡單介紹:
(1)緩衝活性炭酵母瓊脂(BCYE Agar;Buffered Charcoal Yeast Extract Agar),是由活性炭酵母瓊脂(CYE Agar)改良而來,主要增加了緩衝劑(ACES Buffer),這種緩衝劑有利於生長條件要求苛刻的某些軍團菌生長。
(2)有關該培養基的原理、配方和菌落特征等知識,請參考BCYE培養基原理及實驗現象:BCYE培養基原理及實驗現象 點擊查看相關文章,本篇文章主要對該培養基使用時的一些注意事項做一下補充說明。
二、培養基的製備方法
(1)有關該培養基的配製方法,經典文獻中是這樣描述的:
a、先將酵母浸粉和瓊脂混合於水中加熱、溶解,然後加入活性炭和ACES緩衝劑,混勻,121℃高壓滅菌15分鍾;
b、待冷卻至45-50℃,無菌加入已過濾除菌的4%L-半胱氨酸鹽酸鹽水溶液10ml和2.5%焦磷酸鐵鹽水溶液10ml,混合均勻,用氫氧化鉀4-5ml,將pH調至6.8-7.0,傾入無菌平皿。
(2)為了方便使用,可選用我公司生產的幹粉培養基和配套成品試劑,使用方法如下:
稱取本品38.0g,加熱溶解於1000ml蒸餾水中,分裝三角瓶,每瓶100ml,121℃高壓滅菌15分鍾,冷至50℃左右時,加入1支L-半胱氨酸鹽酸鹽(0.04g/支)和1支可溶性焦磷酸鐵(0.025g/支),混勻,傾入無菌平皿。
注:若加入一套BCYE抑菌劑可配製成選擇性平板。加入添加劑後若pH值不正確,用KOH進行調整。
三、注意事項:
上述培養基的兩種製備方法中,尤其要注意兩點:
(1)可溶性焦磷酸鐵鹽【Fe4(P2O7)3】水溶液配置後,必須保存於黑暗幹燥處,如果變成黃或褐色則不能再使用。加熱時,不要超過60℃,50℃水浴可使其溶化完全。
(2)傾注平皿時,需不停搖動,使活性炭在瓊脂中分布均勻。
四、更多選擇:
如果覺得上麵兩種配製方法比較繁瑣,還可以選用我們公司生產的BCYE即用型培養基平板等相關產品。
相關產品:
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