(一)方法一
(1)染色劑:繪圖墨汁;0.5%番紅溶液,純甲醇;
(2)染色步驟:在載片一端滴一滴無菌水,取少許菌苔在水滴中製成懸液。取一滴墨汁與菌懸液混合,並用另一載片之一端將此水滴在載片上刮成薄膜,風於。用純甲醇固定1 min。加0.5%番紅液數滴滴於塗片上,衝去殘餘甲醇,並染30s,然後傾去染液,立即吸於,備鏡檢。
(3)鏡檢;背景黑色,莢膜無色,細胞紅色。
(4)注意事項:經比較,滬光繪圖墨水(上海墨水廠)較好;北京繪圖碳素墨水(北京墨水廠)顆粒太粗;北京墨汁(北京墨汁廠)膠性太大。
(二) 方法二
1.染色劑
剛果紅(Congo red) |
2%水溶液 |
明膠 |
0.01%~0.1%水溶液 |
鹽酸 |
1% |
呂氏美藍:乙醇美藍飽和液(約2%) |
30ml |
KOH水溶液(0.01%) |
100ml |
2.染色步驟
將剛果紅水溶液和明膠水溶液各一滴滴於幹淨的載玻片上;用接種環醮取細菌培養物或懸浮液在玻片上與上述兩滴溶液混勻並風幹;滴加1%的鹽酸衝洗,使圖片呈藍色;用蒸餾水漂洗,除去鹽酸;用美藍複染1min,風幹後鏡檢。
3.鏡檢
(1)有莢膜的菌,菌體藍色,莢膜不著色,背景藍紫色;
(2)無莢膜的菌,菌體藍色,背景藍紫色。由於幹燥菌體收縮,菌體四周也可能有一圈狹窄的不著色環,但這不是莢膜。莢膜的不著色部分寬。
4.注意事項
(1)莢膜的產生與培養基有關,所以應選用合適的培養基。在報告結果時應注明所用的培養基。
(2)有些動物致病菌僅在動物體內生長時形成莢膜,而在培養基中培養時不形成莢
(3)不同的種,產生莢膜的時間不盡相同,必要時可在不同時間觀察。
(4)有時菌體著色差。
本文節選自《常見細菌係統鑒定手冊》第十二章。
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