（一）染劑
（1）石炭酸複紅液
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堿性複紅（Basic Fuchsine,一品紅） |
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乙醇飽和液（約10%） |
10ml |
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石炭酸水溶液（5%） |
100ml |
兩液相混搖勻備用。
（2）酸性乙醇
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乙醇（95%） |
100ml |
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濃鹽酸 |
3ml |
（3）呂氏美藍染液
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美藍（次甲基藍、亞甲基藍、甲烯藍） |
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乙醇飽和液（約2%） |
30ml |
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KOH水溶液（0.01%） |
100ml |
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KOH 1% 1ml加水99ml即為0.01%的KOH |
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將兩液混合後備用。此液陳舊者效果更好。
（二）染色步驟
（1）按常規製塗片；
（2）滴加石炭酸複紅於玻片上，並於玻片下緩緩加熱，使染液冒蒸氣但不沸騰，並繼續滴加染液，不使塗片上染液蒸幹，這樣保持5min；
（3）塗片冷後，傾去染液，用酸性乙醇脫色到無紅色染劑洗脫為止；
（4）徹底水洗；
（5）用呂氏美藍複染2～3 min；
（6）水洗、 吸幹、鏡檢。
（三）觀察結果
鏡檢時抗酸性細菌菌體呈紅色，即抗酸染色陽性，非抗酸性細菌性呈藍色。
本文節選自《常見細菌係統鑒定手冊》第十二章。
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