一、培養基用途:
用於梭菌的增菌培養和計數。
二、培養基成分及使用方法:
1.培養基成分
成分 |
含量(g/L) |
蛋白腖 |
10.0 |
牛肉浸粉 |
10.0 |
酵母粉 |
3.0 |
葡萄糖 |
5.0 |
可溶性澱粉 |
1.0 |
氯化鈉 |
5.0 |
醋酸鈉 |
3.0 |
L-半胱氨酸鹽酸鹽 |
0.5 |
瓊脂 |
0.5 |
pH 6.8±0.1 25℃ |
2.使用方法
稱取本品38.0g,加熱溶解於1000ml蒸餾水中,分裝於試管中,每支10mL,每支試管上方用液體石蠟覆蓋。121℃高壓滅菌15分鍾。
三、原理:
蛋白腖、牛肉浸粉、酵母粉、可溶性澱粉和L-半胱氨酸鹽酸鹽提供碳源、氮源、維生素和生長因子;葡萄糖為可發酵糖類;氯化鈉維持均衡的滲透壓;醋酸鈉可抑製革蘭氏陰性菌;微量瓊脂(0.5g)增加了其還原環境的穩定性,可以防止液體對流,即防止二氧化碳、氧氣和還原產物的擴散,有利於厭氧環境的形成;無動力的細菌在此培養基中呈顆粒狀或條狀生長,可進行計數;有動力的細菌在培養基中通常呈渾濁生長,一般不能計數。
四、實驗結果:
1、按使用方法製備培養基,接種以下質控菌株,在30-35℃厭氧培養48小時。
質控菌株 |
菌株編號 |
接種量(CFU) |
生長情況(回收率) |
其他特征 |
生孢梭菌 |
CMCC(B)64941 |
10-100 |
良好 |
渾濁 |
產氣莢膜梭菌 |
ATCC13124 |
10-100 |
良好 |
渾濁 |
2、產氣莢膜梭菌和生孢梭菌在培養基中的生長情況如下圖所示:
強化梭菌培養基(RCM)微生物質控結果
a:產氣莢膜梭菌,b:生孢梭菌
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