唐菖蒲伯克霍爾德氏菌（椰毒假單胞菌酵米麵亞種）的檢驗

  “椰毒假單胞菌”，全稱椰毒假單胞酵米麵亞種Pseudomonas cocovenenans subsp.Farinofermentans，是—種存在於酵米麵、變質鮮銀耳及其他澱粉類發酵產品中的食源性致病菌。

  由於椰毒假單胞酵母菌酵米麵亞種不是國際公開發表和承認的細菌分類科學名稱，1999年劃分為唐菖蒲伯克霍爾德氏菌Burkholderiagladioli的一個病原型，目前現行標準GB/T 4789.29-2003《食品衛生微生物學檢驗椰毒假單胞菌酵米麵亞種檢驗》。2018年9月國家衛生健康委員會發布的《食品安全國家標準食品微生物學檢驗唐菖蒲伯克霍爾德氏菌（椰毒假單胞菌酵米麵亞種）檢驗(征求意見稿）》中，將該菌進行更名，同時新增分離培養基mPDA同PCFA用於唐菖蒲伯克霍爾德氏菌（椰毒假單胞菌酵米麵亞種）的分離。

唐菖蒲伯克霍爾德氏菌檢驗流程圖

一、前增菌以及選擇性分離過程

前增菌：

澱粉類食品25g+225mLGVC增菌液，均質混勻，36土1℃，24-48h。

鮮銀耳1g+20mL GVC增菌液，均質混勻，36土1℃，24-48h。

分離：

用直徑3mm的接種環取增菌液一環，分別劃線接種於mPDA平板和PCFA平板，36℃±1℃培養24 h～48 h。觀察各個平板上生長的菌落。

mPDA平板	PCFA平板
24-48h，紫色、光滑、濕潤、邊緣整齊 培養48h後，部分菌落中心可有凸起呈草帽狀	24-48h，灰白色，光滑、濕潤、邊緣整齊

二、初篩實驗

  自選擇性瓊脂平板上分別挑取5個以上典型或可疑菌落，分區劃線卵黃瓊脂平板，36℃±1℃培養。

  挑取培養18～24 h的菌落進行革蘭氏染色及氧化酶試驗。對於革蘭氏染色陰性、氧化酶試驗陰性的菌繼續培養至48 h±2 h。

  對於卵磷脂酶陽性，帶有虹彩環的單個菌落，接種PDA平板，36℃±1℃培養24 h±2 h。

卵黃瓊脂（卵磷脂酶試驗)		PDA平板
培養24h後，菌落2mm～3mm，表麵光滑、濕潤，培養48h後，菌落周圍形成乳白色混濁環，斜射光下可見菌落及周圍培養基表麵呈虹彩現象。 (通常需培養3-4d才看到明顯特征)		36土1℃，24-48h，菌落灰白或乳白色，光滑，邊緣整齊，中心有凸起，呈草帽狀。

三、生化試驗

  從純培養的PDA平板上挑取菌苔進行生化鑒定。唐菖蒲伯克霍爾德氏菌生化特征見下表。可選擇生化鑒定試劑盒或微生物生化鑒定係統。

唐菖蒲伯克霍爾德氏菌檢驗用培養基列表

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