一、試驗原理:
本培養基用於濾膜法測定生活飲用水及其水源水中的總大腸菌群。
蛋白腖為微生物的生長提供氮源和維生素;乳糖為可發酵的糖類;瓊脂是培養基的凝固劑;磷酸氫二鉀為緩衝劑;亞硫酸鈉和品紅對革蘭氏陽性菌有弱抑製作用,加入20mL無水乙醇可以提高培養基的抑菌性。亞硫酸鈉可以使堿性品紅還原脫色,大腸杆菌可以發酵乳糖產生乙醛和酸,乙醛與亞硫酸鈉和品紅化合物結合形成紫紅色菌落,快速發酵乳糖的細菌使堿性品紅結晶析出,菌落產生綠色金屬光澤。
二、培養基配方(g/L):
蛋白腖 |
10.0 |
磷酸氫二鉀 |
2.5 |
乳糖 |
10.0 |
無水亞硫酸鈉 |
3.3 |
堿性品紅 |
0.3 |
瓊脂 |
12.5 |
pH 7.4±0.2 25℃ |
三、試驗方法:
1、稱取本品39.0g,加入20 mL無水乙醇和980 mL蒸餾水中,加熱攪拌溶解,121℃高壓滅菌15 min,冷卻後傾入無菌空平皿中,備用。
2、製備質控菌液,接種到培養基平板上。
3、放置36±1℃需氧培養24±2小時。
四、結果觀察與解釋
接種以下質控菌株,放置36±1℃需氧培養24±2小時。
質控菌株 |
菌株編號 |
接種量(CFU) |
參比或計數培養基 |
方法 |
質控結果 |
其它特征 |
大腸埃希氏菌 |
ATCC25922 |
20-200 |
TSA |
定量 |
PR≥0.7 |
紫紅色菌落,有金屬光澤 |
糞腸球菌 |
ATCC29212 |
/ |
/ |
半定量 |
G≤1 |
/ |
鼠傷寒沙門氏菌 |
ATCC14028 |
/ |
/ |
定性 |
/ |
橙紅色菌落 |
弗氏檸檬酸杆菌 |
ATCC43864 |
20-200 |
TSA |
定量 |
PR≥0.7 |
紫紅色菌落,稍有金屬光澤 |
大腸埃希氏菌 |
ATCC8739 |
20-200 |
TSA |
定量 |
PR≥0.7 |
紫紅色菌落,有金屬光澤 |
遠藤氏瓊脂培養基微生物質控結果
a:大腸埃希氏菌ATCC25922 b:糞腸球菌ATCC29212 c:鼠傷寒沙門氏菌ATCC14028
d:弗氏檸檬酸杆菌ATCC43864 e:大腸埃希氏菌ATCC8739
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