一、實驗原理:
本培養基用於霍亂弧菌的生化試驗(SN標準)
牛肉粉、酵母粉、月示蛋白腖、蛋白腖提供氮源、維生素和礦物質,乳糖、葡萄糖是可發酵的糖,氯化鈉維持均衡的滲透壓,瓊脂是培養基的凝固劑。
二、培養基配方(g/L):
成分 |
用量 |
|
牛肉粉 |
3.0 |
|
酵母粉 |
3.0 |
|
月示蛋白腖 |
15.0 |
|
蛋白腖 |
5.0 |
|
乳糖 |
5.0 |
|
葡萄糖 |
1.0 |
|
硫酸亞鐵 |
0.2 |
|
氯化鈉 |
20.0 |
|
硫代硫酸鈉 |
0.3 |
|
瓊脂 |
12.0 |
|
酚紅 |
0.024 |
|
pH7.2-7.6 |
25℃ |
三、實驗方法:
稱取本品 64.5g,加熱溶解於1000ml 蒸餾水中,分裝於試管內的 3/4 左右高度,121℃高壓滅菌 15 分鍾,放置高層斜麵備用。
四、結果觀察與解釋
按標簽用法製備培養基,接種以下質控菌株,放置36±1℃需氧培養18-24小時。
質控菌株 |
菌株編號 |
接種量(CFU) |
生長情況 |
其它特征 |
霍亂弧菌非01群 |
HB081127A-1 |
/ |
+++ |
K/A,H2S(-),產氣(-) |
副溶血性弧菌 |
ATCC17802 |
/ |
+++ |
K/A,H2S(-),產氣(-) |
溶藻弧菌 |
ATCC17749 |
/ |
+++ |
K/A,H2S(-),產氣(-) |
大腸埃希氏菌 |
ATCC25922 |
/ |
+++ |
A/A,H2S(-),產氣(+) |
鼠傷寒沙門氏菌 |
ATCC14028 |
/ |
+++ |
K/A,H2S(+),產氣(+) |
普通變形杆菌 |
ATCC13315 |
/ |
+++ |
K/A,H2S(+),產氣(+) |
實驗結果現象與說明:
1.霍亂弧菌非01群、副溶血性弧菌、溶藻弧菌
斜麵紅/底層黃:發酵葡萄糖但不發酵乳糖,是不發酵乳糖的特征的菌類。
2.大腸埃希氏菌
斜麵黃/底層黃:既發酵乳糖也發酵葡萄糖,產生大量的酸使整個培養基呈黃色,同時有產氣現象。
3.鼠傷寒沙門氏菌、普通變形杆菌
斜麵紅/底層黃(部分區域黑色):發酵葡萄糖但不發酵乳糖同時產生硫化氫,是產硫化氫不發酵乳糖特征。
硫化氫的產生:這類菌能分解含硫氨基酸,生成硫化氫,硫化氫和培養基中的鐵鹽反應生成黑色的硫化亞鐵沉澱。
五、注意事項
能產生硫化氫的菌應及時觀察試驗結果,以免生成的硫化鐵形成黑色區域,遮蓋斜麵與底層的顏色影響判斷結果。
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