一、選擇性實驗
1.產品介紹
葡萄球菌選擇性瓊脂110主要用於金黃色葡萄球菌的分離及培養。
2.實驗原理
胰酪蛋白腖、酵母浸粉提供微生物生長所需的碳氮源、維生素和氨基酸；D-甘露醇為可發酵的糖類；乳糖為金黃色葡萄球菌可利用的糖類；氯化鈉用以維持反應體係的滲透壓；磷酸氫二鉀是緩衝劑；瓊脂作用是培養基凝固劑。
3.培養基配方
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成分 |
用量（g/L） |
|
胰酪蛋白腖 |
10.0 |
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酵母浸粉 |
2.5 |
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明膠 |
30.0 |
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D-甘露醇 |
10.0 |
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乳糖 |
2.0 |
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氯化鈉 |
75.0 |
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磷酸氫二鉀 |
5.0 |
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瓊脂 |
15.0 |
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pH7.2±0.2 |
25℃ |
4.實驗方法
①稱取本品149.5g,加熱溶解於1000ml蒸餾水中,121℃高壓滅菌15分鍾,備用；
②樣品液按國家標準、SN標準、ISO標準或其它方法製備而成；
③取適量樣品液塗布接種於已凝固好的葡萄球菌選擇性瓊脂110培養基平板上；
④將接好菌的平板倒置放入培養箱，於36±1℃培養18-24h，觀察菌株生長情況。
5.結果判斷
接種以下質控菌株，平板倒置放入36±1℃培養箱中，培養18-24h。
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質控菌株 |
菌株編號 |
接種量（CFU） |
生長情況 |
其它特征 |
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金黃色葡萄球菌 |
ATCC 25923 |
10-100 |
+++ |
生長良好，有明顯菌落 |
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金黃色葡萄球菌 |
ATCC 6538 |
10-100 |
+++ |
生長良好，有明顯菌落 |
|
表皮葡萄球菌 |
CMCC 26069 |
10-100 |
+++ |
生長良好，有明顯菌落 |
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大腸埃希氏菌 |
ATCC 25922 |
100-1000 |
- |
生長抑製 |
葡萄球菌選擇性瓊脂110微生物生長結果如圖一。
a：金黃色葡萄球菌25923；b：金黃色葡萄球菌6538；c：表皮葡萄球菌26069；d：大腸埃希氏菌25922
圖一
二、驗證實驗
1.甘露醇發酵產酸實驗
配製0.04%的溴麝香草酚藍指示劑滴加於菌落,如變為黃色,即為陽性。
1.1實驗原理及現象
金黃色葡萄球菌可利用甘露醇產酸，溴麝香草酚藍指示劑為pH指示劑（變色範圍為pH值6.0～7.6），在酸性條件下顯黃色，即溴麝香草酚藍指示劑使金黃色葡萄球菌顯示陽性實驗結果如圖二。
2.明膠液化實驗
將硫酸銨飽和水溶液滴加於菌落,10分鍾後,如圍繞菌落出現一清晰帶,即為陽性。
2.1實驗原理及現象
金黃色葡萄球菌能產生明膠酶，使明膠分解為氨基酸，從而失去凝固力，即顯示陽性實驗結果如圖二。
a：金黃色葡萄球菌25923；b：金黃色葡萄球菌6538
圖二
三、注意事項
1.本產品僅可用於科研實驗。
2.使用此培養基後續應輔助其他相關實驗驗證實驗結果。
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注：本文屬betway必威西汉姆联生物原創，未經允許不得轉載。
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