一、簡介
小腸結腸炎耶爾森氏菌（Yersinia enterocolitica），簡稱小腸耶爾森氏菌，是革蘭氏陰性杆菌或球杆菌，大小為1-3.5×0.5-1.3μm，多單個散在，有時排列成短鏈或成堆。本菌不形成芽胞，無莢膜，有周鞭毛；但其鞭毛在30℃以下培養條件形成，溫度較高時即喪失，因此表現為30℃以下有動力，而35℃以上則無動力。該菌是能在冷藏溫度下生長的少數幾種腸道致病菌之一，在4℃條件下能保存和繁殖。小腸耶爾森氏菌在自然界分布很廣。
二、參考標準
《GB 4789.8-2016 食品安全國家標準 小腸結腸炎耶爾森氏菌檢驗》
三、檢驗方法以及結果分析
1.分離
將樣品進行梯度稀釋後，選擇合適的稀釋度塗布CIN-1瓊脂平板和改良Y 瓊脂平板，26℃±1℃培養48h±2h。
小腸耶爾森氏菌典型菌落在CIN-1上為深紅色中心，周圍具有無色透明圈(紅色牛眼狀菌落)，菌落大小為1mm～2mm，在改良Y瓊脂平板上為無色透明、不黏稠的菌落。如圖1所示：
A：CIN-1瓊脂平板；B：改良Y瓊脂平板
圖1
2.改良克氏雙糖試驗
分別挑取CIN-1瓊脂平板和改良Y瓊脂平板的可疑菌落3個～5個，分別接種於改良克氏雙糖鐵瓊脂，接種時先在斜麵劃線，再於底層穿刺，26℃±1℃培養24h，將斜麵和底部皆變黃且不產氣的培養物做進一步的生化鑒定。如圖2所示：
小腸耶爾森氏菌改良克氏雙糖試驗結果
圖2
3.尿素酶試驗和動力觀察
用接種環挑取可疑培養物，接種到尿素培養基中，26℃±1℃培養2h～4h。將尿素酶試驗陽性菌落分別接種於兩管半固體培養基中，於26℃±1℃和36℃±1℃培養24h。將在26℃有動力而36℃無動力的可疑菌培養物劃線接種營養瓊脂平板，進行純化培養，用純化物進行革蘭氏染色鏡檢和生化試驗。
小腸耶爾森氏菌尿素酶試驗陽性，培養基變為玫紅色，如圖3所示：
左：空白對照；右：小腸耶爾森氏菌
圖3
小腸耶爾森氏菌穿刺接種於半固體瓊脂中，在26℃培養有動力而在36℃培養無動力，如圖4所示：
A：空白對照；B：小腸耶爾森氏菌
圖4
4.生化鑒定
從營養瓊脂平板上挑取單個菌落接種生化反應管，生化反應在26℃±1℃進行。小腸耶爾森氏氏菌的主要生化特征以及與其他相似菌的區別見表1。
表1 小腸耶爾森氏氏菌與其他相似菌的生化性狀鑒別表
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項目 |
小腸耶爾森氏氏菌 |
中間型耶爾森氏菌 |
弗氏耶爾森氏菌 |
克氏耶爾森氏菌 |
假結核耶爾森氏菌 |
鼠疫耶爾森氏菌 |
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動力(26℃) |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
- |
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尿素酶 |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
- |
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V-P試驗(26℃) |
+ |
+ |
+ |
- |
- |
- |
|
鳥氨酸脫羧酶 |
+ |
+ |
+ |
+ |
- |
- |
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蔗糖 |
d |
+ |
+ |
- |
- |
- |
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棉子糖 |
- |
+ |
- |
- |
- |
d |
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山梨醇 |
+ |
+ |
+ |
+ |
- |
- |
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甘露醇 |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
+ |
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鼠李糖 |
- |
+ |
+ |
- |
- |
+ |
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注：+陽性；-陰性；d有不同生化型。 |
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使用betway必威西汉姆联生化管進行生化鑒定，小腸耶爾森氏菌生化反應結果為鳥氨酸脫羧酶陽性、蔗糖陽性、棉子糖陰性、山梨醇陽性、甘露醇陽性、鼠李糖陰性和V-P試驗陽性（26℃）。如圖5所示：
A：空白對照；B：小腸耶爾森氏菌
圖5
注：本文屬betway必威西汉姆联生物原創，未經允許不得轉載。
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