一、培養基用途
mCPC培養基用於致病性弧菌的選擇性分離。
二、檢驗原理
蛋白腖、牛肉粉作為培養基中的基礎營養物質，提供細菌生長所需的碳氮源、維生素和其他的生長因子；氯化鈉維持培養基體係的滲透壓平衡；多粘菌素B和多粘菌素E能抑製副溶血性弧菌和溶藻弧菌等非目標菌的生長；纖維二糖為可發酵的糖類；溴百裏酚蘭和甲酚紅為pH指示劑；瓊脂是培養基的凝固劑。本培養基一纖維二糖作為鑒別劑，創傷弧菌可發酵纖維二糖產酸顯黃色。
三、培養基配方（g/L）
|
蛋白腖 |
10.0 |
| 氯化鈉 | 20.0 |
| 瓊脂 | 15.0 |
| 甲酚紅 | 0.04 |
| 溴百裏酚蘭 | 0.04 |
| 牛肉粉 | 5.0 |
| pH值7.5-7.7 | 25℃ |
四、試驗方法
1.稱取本品5.0克，加熱煮沸溶解90mL蒸餾水中，冷卻到48-55℃時加入10%纖維二糖水溶液10mL和1支mCPC添加劑（多粘菌素E 40000units和多粘菌素B 10000units）混勻，傾入無菌空平皿，無需高壓滅菌；
2.製備質控菌液；
3.目標菌（創傷弧菌）：選擇合適稀釋度的質控菌液100μL，均勻塗布於待測培養基上，每一稀釋度接種兩個平板；非目標菌（特異性）：使用1μL接種環挑取1環霍亂弧菌菌液，定性劃線接種於待測平板；非目標菌（選擇性）：分別使用1μL接種環挑取1環副溶血性弧菌、大腸埃希氏菌和金黃色葡萄球菌菌液，在待測平板表麵劃六條平行線；
4.放置36±1℃需氧培養24-48小時，記錄試驗結果。
五、試驗結果判斷
接種以下質控菌株，放置36±1℃需氧培養24-48小時。
|
質控菌株 |
菌株編號 |
接種量(CFU) |
參比或計數培養基 |
方法 |
質控結果 |
其他特征 |
|
副溶血性弧菌 |
ATCC17802 |
/ |
/ |
半定量 |
G≤1 |
抑製 |
|
霍亂弧菌 |
/ |
/ |
/ |
定性 |
/ |
紫色菌落 |
|
創傷弧菌 |
ATCC27562 |
20-200 |
3%NaCl TSA |
定量 |
PR≥0.1 |
圓形扁平，中心不透明， 邊緣透明的黃色菌落 |
|
大腸埃希氏菌 |
ATCC25922 |
/ |
/ |
半定量 |
G≤1 |
抑製 |
|
金黃色葡萄球菌 |
ATCC25923 |
/ |
/ |
半定量 |
G≤1 |
抑製 |
mCPC培養基質控結果：
 |
|
 |
|
 |
|
副溶血性弧菌 抑製 |
|
霍亂弧菌 紫色菌落 |
|
金黃色葡萄球菌 抑製 |
 |
|
|
|
 |
|
大腸埃希氏菌 抑製 |
|
|
|
創傷弧菌 圓形扁平，中心不透明，邊緣透明的黃色菌落 |
相關產品：
注：本文屬betway必威西汉姆联生物原創，未經允許不得轉載。
下一篇：克氏檸檬酸鹽培養基原理和質控方法
