一、培養基用途
用於生活飲用水及其水源水中糞大腸菌群測定。
二、試驗原理
胰蛋白腖、多價蛋白腖和酵母粉提供氮源、維生素和生長因子；氯化鈉維持均衡的滲透壓；乳糖為可發酵糖類；3號膽鹽抑製革蘭氏陽性菌；瓊脂是培養基的凝固劑；苯胺藍和玫紅酸為pH指示劑。
糞大腸菌群可在44.5℃條件下分解乳糖產酸，使培養基pH下降，菌落為亮藍色，其他不發酵乳糖的腸道菌菌落為無色、灰色或淡紅色。
三、培養基配方（g/L）
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多價蛋白腖 |
5.0 |
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胰蛋白腖 |
10.0 |
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乳糖 |
12.5 |
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酵母粉 |
3.0 |
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三號膽鹽 |
1.5 |
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氯化鈉 |
5.0 |
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苯胺藍 |
0.2 |
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瓊脂 |
15.0 |
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玫紅酸 |
0.1 |
| pH值7.4±0.2 | 25℃ |
四、試驗方法
1.稱取本品52.3g，加熱煮沸溶解於1000ml蒸餾水中，冷卻至45-50℃左右時，傾入無菌平皿，備用。無需高壓滅菌。
2.製備好的平板保存於2-8℃，應避免光線直接照射。幹燥培養基應放置於陰暗幹燥處，室溫保存。
3.使用前，把製備好的平板放置室溫10-20分鍾。
4.製備質控菌液。選擇合適稀釋度的質控菌液0.1ml，均勻塗布於待測平板以及參比平板上，每一稀釋度接種兩個平板。
5.用1μL接種環取非目標菌質控菌液1環，將接種環接觸容器邊緣3次，去除多餘液體，在平板表麵劃六條平行直線，同時接種兩個平板。
6.44.5℃倒置培養基培養24±2小時，記錄實驗結果。
五、結果觀察與解釋
接種以下質控菌株，44.5℃倒置培養基培養24±2小時：
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質控菌株 |
菌株編號 |
接種量(CFU) |
參比或計數培養基 |
方法 |
質控評定標準 |
其他特征 |
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大腸埃希氏菌 |
ATCC25922 |
20-200 |
TSA |
定量 |
PR≥0.7 |
藍色菌落 |
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鼠傷寒沙門氏菌 |
ATCC14028 |
20-200 |
PR≥0.7 |
無色菌落 |
||
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福氏誌賀氏菌 |
ATCC12022 |
20-200 |
PR≥0.7 |
無色菌落 |
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產氣腸杆菌 |
ATCC13048 |
20-200 |
PR≥0.7 |
灰色菌落 |
||
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金黃色葡萄球菌 |
ATCC25923 |
/ |
/ |
半定量 |
G≤1 |
/ |
MFC瓊脂微生物質控結果：
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大腸埃希氏菌 藍色菌落 |
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鼠傷寒沙門氏菌 無色菌落 |
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福氏誌賀氏菌 無色菌落 |
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產氣腸杆菌 灰色菌落 |
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金黃色葡萄球菌 抑製 |
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六、注意事項
本培養基僅為細菌鑒定的一部分，需做其他補充試驗。
注：本文屬betway必威西汉姆联生物原創，未經允許不得轉載。
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