一、培養基用途
本培養基用於革蘭氏陰性腸杆菌的分離培養。
二、試驗原理
牛肉粉、蛋白腖為微生物的生長提供氮源、碳源及維生素;乳糖是可發酵的糖類;檸檬酸鈉、檸檬酸鐵銨和去氧膽酸鈉可抑製革蘭氏陽性菌的生長;中性紅為pH指示劑,發酵乳糖產酸的細菌菌落為紅色,不發酵乳糖的細菌菌落為無色;瓊脂是培養基的凝固劑。
三、培養基配方(g/L)
牛肉粉 |
9.5 |
蛋白腖 |
10.0 |
乳糖 |
10.0 |
檸檬酸鈉 |
20.0 |
檸檬酸鐵銨 |
2.0 |
去氧膽酸鈉 |
5.0 |
中性紅 |
0.02 |
瓊脂 |
13.0 |
pH值7.3±0.2 | 25℃ |
四、試驗方法
1、稱取本品69.52g,加熱攪拌溶解於1000mL蒸餾水中,煮沸1分鍾,冷至50℃左右時,傾入無菌平皿中,無需高壓滅菌。
2、製備質控菌液,接種到培養基上。
3、放置於36±1℃恒溫培養箱中需氧培養18-24小時。
五、結果觀察與解釋
接種以下質控菌株,放置於36±1℃恒溫培養箱中需氧培養18-24小時。
質控菌株 |
菌株編號 |
接種量 |
回收率 |
生長情況 |
其它特征 |
福氏誌賀氏菌 |
ATCC 12022 |
10-100 |
≥70% |
+++ |
無色透明菌落 |
鼠傷寒沙門氏菌 |
ATCC 14028 |
10-100 |
≥70% |
+++ |
無色透明菌落 |
大腸埃希氏菌 |
ATCC 25922 |
100-1000 |
<10% |
+/﹣ |
粉紅色菌落,有膽鹽沉澱環 |
糞腸球菌 |
ATCC 29212 |
100-1000 |
/ |
- |
抑製 |
去氧膽酸鹽枸櫞酸鹽瓊脂培養基微生物質控結果:
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福氏誌賀氏菌 無色透明菌落 |
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鼠傷寒沙門氏菌 無色透明菌落 |
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大腸埃希氏菌 粉紅色菌落,有膽鹽沉澱環 |
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糞腸球菌 抑製 |
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