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TCBS瓊脂的試驗原理、方法及結果

劉凱鳳
錄入時間:2021-5-21 15:11:31 來源:青島betway必威西汉姆联生物

一、試驗原理

 TCBS瓊脂用於致病性弧菌的選擇性分離(GB、SN標準)。成分中的酵母浸粉、蛋白腖提供菌體生長所需的氮源、碳源及維生素等各種生長因子;較高濃度的氯化鈉提供了弧菌嗜鹽生長的環境,其形成的高滲透壓抑製了其他細菌的生長;蔗糖是可發酵碳源;枸櫞酸鈉、高pH堿性環境及硫代硫酸鈉的存在抑製腸道菌的生長,另硫代硫酸鈉還提供硫源,在檸檬酸鐵存在的條件下可以檢測細菌產硫化氫;牛膽粉、牛膽酸鈉主要抑製革蘭氏陽性菌的生長;溴麝香草酚蘭和麝香草酚蘭作為酸堿指示劑,在該平板上生長的細菌若能利用蔗糖產酸,則使得混合指示劑(溴麝香草酚蘭和麝香草酚蘭)的顏色變成黃色;瓊脂起凝固的作用。


二、培養基配方(g/L)


酵母浸粉

5.0

蛋白腖

10.0

硫代硫酸鈉

10.0

枸櫞酸鈉

10.0

牛膽粉

5.0

牛膽酸鈉

3.0

蔗糖

20.0

氯化鈉

10.0

檸檬酸鐵

1.0

溴麝香草酚蘭

0.04

麝香草酚蘭

0.04

瓊脂

15.0

pH值8.5-8.7 25℃


三、試驗方法


 1.稱取本品89g,煮沸溶解於1000mL蒸餾水(可根據培養需要擴大或縮小產品用量),冷至45-50℃,傾入無菌平皿,備用;

 2.質控菌液按國標等標準或其它方法製備而成;

 3.取相應菌液按塗布或劃線方式接種於培養基中;

 4.將接好菌的平板倒置放入恒溫培養箱,於36±1℃需氧培養18-24h,觀察實驗結果。


四、試驗結果判斷

 1.外觀

 此培養基煮沸滅菌後製備好的固體平板為綠色。

 2.生物學實驗

 接種以下質控菌株,放入培養箱中,於36±1℃培養24±2h,觀察試驗結果。

質控菌株

菌株編號

接種量(CFU)

參比或計數培養基

方法

質控情況

副溶血性弧菌

ATCC17802

20-200

3%NaCl TSA

定量

PR≥0.2,藍綠色鬥笠狀菌落,H2S陰性

溶藻弧菌

ATCC33787

20-200

3%NaCl TSA

定量

PR≥0.2,黃色菌落,H2S陰性

霍亂弧菌

/

20-200

3%NaCl TSA

定量

PR≥0.2,黃色菌落,H2S陰性

金黃色葡萄球菌

ATCC25923

/

/

半定量

G≤1

大腸埃希氏菌

ATCC25922

/

/

半定量

G≤1

 TCBS瓊脂微生物質控結果:






副溶血性弧菌

藍綠色鬥笠狀菌落,H2S陰性


溶藻弧菌

黃色菌落,H2S陰性


霍亂弧菌

黃色菌落,H2S陰性

  

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注:本文屬betway必威西汉姆联生物原創,未經允許不得轉載。

 

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