一、用途
用於細菌的精氨酸雙水解酶試驗。
二、實驗原理
細菌前期利用培養基中的糖類發酵產酸,使培養基變黃;酸性條件下可刺激細菌產生氨基酸脫羧酶,精氨酸水解後生成鳥氨酸、氨及CO2,鳥氨酸又在脫羧酶的作用下生成腐胺,腐胺和氨均為堿性物質,可使培養基變堿,顏色由黃變紫色,若細菌不能分解精氨酸產堿,培養基仍然呈黃色。
三、培養基配方(g/L)
酵母浸粉 |
3.0 |
L-精氨酸 |
5.0 |
葡萄糖 |
1.0 |
溴甲酚紫 |
0.016 |
氯化鈉 |
30 |
pH6.8±0.1 | 25℃ |
此配方可以進行改良或增加營養成分以獲得最佳的結果
四、試驗方法
1、製備質控菌液,將標準儲備菌株接種到非選擇性肉湯中或采用其他製備方法,製備成5 McFarland濁度(約109CFU/ml)的菌懸液。
2、用磨砂輪在安瓿瓶頸部劃線一圈,掰開待用。
3、吸取0.05ml-0.08ml(約1-2滴)菌懸液至生化管中,覆蓋300μL液體無菌石蠟,36±1℃培養24±3h後,觀察試驗結果。
五、結果觀察與解釋
接種以下質控菌株,在36±1℃需氧培養24±3h:
質控菌株 |
菌株編號 |
生長情況 |
其他特征 |
副溶血性弧菌 |
ATCC17802 |
+++ |
陰性,黃色 |
霍亂弧菌 |
/ |
+++ |
陰性,黃色 |
溶藻弧菌 |
ATCC17749 |
+++ |
陰性,黃色 |
創傷弧菌 |
ATCC27562 |
+++ |
陰性,黃色 |
陰溝腸杆菌 |
ATCC23355 |
+++ |
陽性,紫色 |
精氨酸雙水解酶肉湯生化管質控結果:
六、注意事項
本培養基僅為細菌鑒定的一部分,需做其他補充試驗。
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