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紫紅膽鹽葡萄糖瓊脂培養基原理和現象

李令梅
錄入時間:2021-5-28 10:45:06 來源:青島betway必威西汉姆联生物

一、培養基用途及原理


 用於藥品中耐膽鹽革蘭氏陰性菌的檢驗。


 明膠胰酶水解物、酵母浸出粉提供細菌生長的基本營養,脫氧膽酸鈉可抑製革蘭氏陽性菌的生長,在酸性條件下脫氧膽酸鹽可沉澱析出;結晶紫可抑製革蘭氏陽性菌及部分真菌的生長;葡萄糖為唯一碳源,氯化鈉維持滲透壓,瓊脂為凝固劑,中性紅為酸堿指示劑,酸性條件下為紅色,堿性條件下為橙黃色。


 耐膽鹽革蘭氏陰性菌可在此培養基中生長,部分細菌可分解葡萄糖產酸,菌落顯桃紅色,周圍有膽鹽沉澱環,產酸弱或不產酸的細菌可呈現淡紅色或橙黃色,菌落周圍通常沒有沉澱環。


二、培養基配方(g/L)


明膠胰酶水解物

7.0

酵母浸出粉

3.0

脫氧膽酸鈉

1.5

葡萄糖

10.0

氯化鈉

5.0

中性紅

0.03

結晶紫

0.002

瓊脂

15.0

pH7.4±0.2 25℃



三、試驗方法


 1、稱取本品41.5g,加熱溶解於1000ml蒸餾水中,煮沸不要超過2分鍾,無需高壓滅菌。冷卻至50℃左右時,混勻傾入無菌平皿,臨用時製備不得超過3小時。製備好的平板保存於2-8℃,應避免光線直接照射。幹燥培養基應放置於陰暗幹燥處,室溫保存。使用前,把製備好的平板放置室溫10-20分鍾。


 2、製備質控菌液。


 3、選擇合適稀釋度的目標菌質控菌液0.1ml,均勻塗布於平板上,每一稀釋度接種兩個平板。


 4、30-35℃倒置培養基培養18-24小時,記錄實驗結果。


四、結果觀察與解釋  

                                      

 接種以下質控菌株,30-35℃倒置培養基培養18-24小時:

質控菌株

菌株編號

接種量(CFU)

生長情況

回收率

其他特征

大腸埃希氏菌

CMCC(B)44102

10-100

+++

≥70%

紅色菌落,有膽鹽沉澱環

金黃色葡萄球菌

CMCC(B)26003

/

-

/

抑製

銅綠假單胞菌

CMCC(B)10104

10-100

+++

≥70%

淡紅色菌落至橙黃色菌落


 紫紅膽鹽葡萄糖瓊脂微生物質控結果:






銅綠假單胞菌

淡紅色菌落至橙黃色菌落


大腸埃希氏菌

紅色菌落,有膽鹽沉澱環


金黃色葡萄球菌

抑製


五、注意事項


 本培養基僅為細菌鑒定的一部分,需做其他補充試驗。


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 注:本文屬betway必威西汉姆联生物原創,未經允許不得轉載。

 

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