D/E中和瓊脂的使用

一、試驗用途和原理

  該培養基主要用於用於衛生環境表麵微生物計數和分離培養。

 胰蛋白腖和酵母粉提供氮源、維生素和生長因子；葡萄糖提供碳源；硫代硫酸鈉、硫乙醇酸鈉、亞硫酸氫鈉、卵磷脂和吐溫80為中和劑，可中和醛類消毒劑、含氯消毒劑、含碘消毒劑、季銨鹽類消毒劑、過氧化物消毒劑等多種消毒劑的消毒作用；溴甲酚紫是酸堿指示劑；瓊脂是培養基的凝固劑。

二、培養基配方（g/L)

胰蛋白腖	5.0
酵母粉	2.5
葡萄糖	10.0
硫代乙醇酸鈉	1.0
硫代硫酸鈉	6.0
亞硫酸氫鈉	2.5
溴甲酚紫	0.02
卵磷脂	7.0
瓊脂	15.0
pH值7.6±0.2	25℃

三、試驗方法

 1.稱取本品49g，另取吐溫-80 5g加入，混勻，加熱攪拌溶解於1000ml蒸餾水，分裝，121℃高壓滅菌15分鍾後，將滅菌完畢的培養基傾入無菌平皿中，備用。

 2.將質控菌株稀釋至合適梯度，使最終細菌含量為100-1000CFU/mL。

 3.用移液槍吸取質控菌株100μL加入備用的平皿中，塗布使菌液在培養基表麵均勻塗開。

 4.將接好菌種的培養基放置於36±1℃需氧環境中倒置培養40-48小時。

四、實驗結果

 D/E中和瓊脂實驗結果：

大腸埃希氏菌 黃色菌落				金黃色葡萄球菌 黃色菌落
鼠傷寒沙門氏菌 黃色菌落				銅綠假單胞菌 紫色菌落
枯草芽孢杆菌 紫色菌落

五、注意事項

 本培養基僅為細菌鑒定的一部分，需做其他補充試驗。

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