一、培養基用途
用於雙歧杆菌的分離培養(GB標準)。
二、培養基成分及使用方法
1.培養基成分(g/L)
蛋白腖 |
5.0 |
肝浸粉 |
4.0 |
牛肉浸粉 |
3.0 |
酵母浸粉 |
2.0 |
胰酪蛋白腖 |
5.0 |
可溶性澱粉 |
0.5 |
L-半胱氨酸 |
0.5 |
葡萄糖 |
10.0 |
磷酸氫二鉀 |
1.0 |
磷酸二氫鉀 |
1.0 |
大豆腖 |
3.0 |
硫酸鎂 |
0.2 |
硫酸亞鐵 |
0.01 |
氯化鈉 |
0.01 |
硫酸錳 |
0.0067 |
吐溫80 |
1.0 |
瓊脂 |
20.0 |
pH7.2±0.1 |
25℃ |
2.使用方法
稱取本品56.23g,加熱溶解於1000ml蒸餾水中,分裝三角瓶,121℃高壓滅菌15min,冷卻至合適溫度,傾入無菌平板。
三、原理
蛋白腖、肝浸粉、牛肉浸粉、酵母浸粉、胰酪蛋白腖和大豆腖提供氮源、維生素和生長因子;葡萄糖提供碳源;氯化鈉維持均衡的滲透壓;硫酸錳、硫酸鎂、硫酸亞鐵可提供雙歧杆菌生長的微量元素;L-半胱氨酸為還原劑,輔助培養基維持厭氧環境,有利於厭氧菌的生長;磷酸氫二鉀和磷酸二氫鉀做緩衝劑;吐溫80可促進雙歧杆菌的生長並能中和一些有毒成分;瓊脂是培養基的凝固劑。
四、實驗結果
1、按使用方法製備培養基,接種以下質控菌株,在36±1℃厭氧培養48-72h。
質控菌株 |
菌株編號 |
接種量(CFU) |
參比或計數培養基 |
方法 |
質控評定標準 |
其他特征 |
嬰兒雙歧杆菌 |
CICC6090 |
/ |
/ |
劃線接種 |
生長良好 |
/ |
長雙歧杆菌 |
CICC6068 |
/ |
/ |
劃線接種 |
生長良好 |
/ |
短雙歧杆菌 |
/ |
/ |
/ |
劃線接種 |
生長良好 |
/ |
2、嬰兒雙歧杆菌在培養基上厭氧培養48h後的生長狀況如圖所示。
BL瓊脂微生物質控結果
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