一、試驗原理
本培養基用於金黃色葡萄球菌的選擇性分離培養。
明膠蛋白腖、酵母浸粉為微生物的生長提供氮源、碳源及維生素;甘露醇為可發酵糖類;酚紅為酸堿指示劑;磷酸氫二鉀為pH緩衝劑;甘氨酸和氯化鋰對金黃色葡萄球菌以外的其它菌株有抑製作用;較高濃度的亞碲酸鉀可抑製多數雜菌的生長,金黃色葡萄球菌可還原亞碲酸鉀,使菌落顯黑色,同時可分解培養基中的甘露醇產酸,使培養基變黃;瓊脂是培養基的凝固劑。
二、培養基配方(g/L)
明膠蛋白腖 |
10.0 |
酵母浸粉 |
5.0 |
甘露醇 |
10.0 |
酚紅 |
0.025 |
磷酸氫二鉀 |
5.0 |
氯化鋰 |
5.0 |
甘氨酸 |
10.0 |
瓊脂 |
16.0 |
pH7.2±0.2 | 25℃ |
三、試驗方法
1、稱取本品61.0g,加熱攪拌溶解於1000mL蒸餾水中,煮沸1分鍾,121℃高壓滅菌15min,冷至45-50℃左右時,加入20mL過濾除菌的1%亞碲酸鉀溶液,混勻,傾入無菌平皿。
2、製備質控菌液,接種到培養基上。
3、放置於30-35℃恒溫培養箱中需氧培養24-48小時。
四、結果觀察與解釋
接種以下質控菌株,放置於30-35℃恒溫培養箱中需氧培養24-48小時。
質控菌株 |
菌株編號 |
接種量 |
回收率 |
生長情況 |
其它特征 |
金黃色葡萄球菌 |
ATCC 25923 |
10-100 |
≥70% |
+++ |
黑色菌落,菌落周圍黃色 |
金黃色葡萄球菌 |
ATCC 6538 |
10-100 |
≥70% |
+++ |
黑色菌落,菌落周圍黃色 |
表皮葡萄球菌 |
CMCC(B)26069 |
10-100 |
≥70% |
+++ |
黑色菌落,菌落周圍不變色 |
大腸埃希氏菌 |
ATCC 25922 |
100-1000 |
/ |
﹣ |
抑製 |
V-J瓊脂培養基微生物質控結果:
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金黃色葡萄球菌ATCC 25923 黑色菌落,菌落周圍黃色 |
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金黃色葡萄球菌ATCC 6538 黑色菌落,菌落周圍黃色 |
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表皮葡萄球菌CMCC(B)26069 黑色菌落,菌落周圍不變色 |
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大腸埃希氏菌ATCC 25922 抑製 |
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