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阪崎腸杆菌顯色培養基(DFI瓊脂)原理及使用方法

李令梅
錄入時間:2021-8-24 14:17:20 來源:青島betway必威西汉姆联生物

一、培養基用途及原理:
  用於嬰兒配方奶粉和其它食品中阪崎腸杆菌的快速檢測。

  阪崎腸杆菌顯色培養基是青島betway必威西汉姆联生物公司根據GB4789.40生產的培養基,胰蛋白腖、大豆蛋白腖提供營養,氯化鈉維持滲透壓,瓊脂為凝固劑,脫氧膽酸鈉主要抑製革蘭氏陽性菌的生長,檸檬酸鐵銨、硫代硫酸鈉可使產硫化氫的非目標菌呈黑色中心,阪崎腸杆菌可特異性分解底物5-溴-4-氯-3-吲哚-α-D-吡喃葡糖甙使菌落顯藍—綠色,其它不產硫化氫、不分解底物的菌一般顯無色或黃色。


二、培養基配方(g/L):

胰蛋白腖
15.0
大豆蛋白腖
5.0
氯化鈉
5.0
檸檬酸鐵銨
1.0
硫代硫酸鈉
1.0
脫氧膽酸鈉
1.0
5-溴-4-氯-3-吲哚-α-D-吡喃葡糖甙
0.1
瓊脂
15.0
pH 7.3±0.2 25℃


三、試驗方法:
  1. 稱取本品8.62g加入200ml蒸餾水,加熱煮沸完全溶解,121℃高壓滅菌15min,冷至50℃左右時,傾入無菌平皿。製備好的平板保存於2-8℃,應避免光線直接照射。幹燥培養基應放置於陰暗幹燥處,室溫保存。
  2. 使用前,把製備好的平板放置室溫10-20分鍾。
  3. 製備質控菌液。
  4. 選擇合適稀釋度的目標菌質控菌液0.1ml,均勻塗布於平板及參比平板上,每一稀釋度每種接種兩個平板。
  5.用1μL接種環取非目標菌質控菌液1環,將接種環接觸容器邊緣3次去除多餘液體,在平板表麵劃六條平行直線,同時接種兩個平板。
  6. 36±1℃倒置培養基培養18-24小時,記錄實驗結果。

四、結果觀察與解釋 :

  接種以下質控菌株,放置36±1℃需氧培養18-24小時。

質控菌株
菌株編號

接種量

(CFU)

參比或計

數培養基

方法

質控評

定標準

其他特征
阪崎腸杆菌
ATCC29004
20-200
TSA
定量
PR≥0.5
藍綠色菌落
金黃色葡萄球菌
ATCC25923
/
/
半定量
G≤1
/
大腸埃希氏菌
ATCC25922
/


/
黃色菌落
傷寒沙門氏菌
ATCC14028
/
/
定性
/
無色菌落,有黑色中心
肺炎克雷伯氏菌
ATCC10031
/


/
無色菌落 





圖1-2  阪崎腸杆菌顯色培養基(DFI瓊脂)微生物質控結果

備注:a:阪崎腸杆菌,b: 金黃色葡萄球菌,c: 肺炎克雷伯氏菌,d:傷寒沙門氏菌,e:大腸埃希氏菌
五、注意事項:

  本培養基僅為細菌鑒定的一部分,需做其他補充試驗。



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注:本文屬betway必威西汉姆联生物原創,未經允許不得轉載。


 

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