糞腸球菌作為一種益生菌，在醫學和食品工程領域得到廣泛應用。另外，腸球菌為消化道內正常存在的一類微生物，在腸黏膜具有較強的耐受和定植能力，並且是一種兼性厭氧的乳酸菌，與厭氧、培養保存條件苛刻的雙歧杆菌相比，更適合於生產和應用。
《GB8538-2016 飲用天然礦泉水：糞鏈球菌檢驗》
采用濾膜法，將250mL水樣用孔徑為0.45μm的濾膜過濾，並將濾膜移至KF鏈球菌瓊脂培養基上，於36℃±1℃恒溫箱中培養48h，如果有紅色或粉紅色菌落生長，需將菌落接種於腦-心浸萃瓊脂培養基上做進一步的確證試驗，如過氧化氫酶反應為陰性，並能在腦-心浸萃瓊脂培養基上於45℃培養後生成菌落，則證實糞鏈球菌的存在，其檢測結果為陽性。
糞鏈球菌檢驗程序見圖1。
圖1 糞鏈球菌檢驗程序
使用方法：稱取本品69.4g，加熱溶解於1000mL蒸餾水中，煮沸至完全溶解，冷卻至50-60℃時，加入無菌1% TTC溶液10mL，混勻，傾入無菌平皿，備用。
4.1.2 培養：
將培養皿倒置，在36℃±1℃培養48h。
4.1.3 計數：
糞鏈球菌菌落在濾膜上呈現大小不等的紅色或粉紅色菌落。挑取不少於5個（不足5個則全挑）可疑菌落，進行革蘭氏染色。鏡檢觀察，糞鏈球菌應為革蘭氏染色陽性球菌，常排列成短鏈狀。根據菌落特征符合情況計數每250mL水樣中的典型菌落數。
糞鏈球菌接種到KF鏈球菌瓊脂平板，培養結果如下圖所示：
圖2 糞鏈球菌在KF鏈球菌瓊脂平板上的菌落特征
4.2 確證性試驗：糞鏈球菌接種到腦-心浸萃瓊脂培養基斜麵，培養結果如下圖所示：
A：糞鏈球菌；B：空白對照；
4.2.2 用接種環從腦-心浸萃瓊脂培養基斜麵上挑取典型培養物到一片清潔的載玻片上，加幾滴新鮮配製的3%過氧化氫到載玻片的塗抹菌苔上，如果沒有氣泡發生，則顯示過氧化氫酶反應為陰性，則菌落可視為可疑糞鏈球菌，需繼續如下的確信過程。如果有氣泡發生，則過氧化氫酶反應為陽性，因此菌落不屬於糞鏈球菌，確信試驗到此即可停止。
A：金黃色葡萄球菌；B：糞鏈球菌；
糞鏈球菌接種到腦-心浸萃液態培養基和膽汁液態培養基中，培養結果如下圖所示：
圖5 糞鏈球菌在腦-心浸萃液態培養基和膽汁液態培養基中的生長情況
左：腦-心浸萃液態培養基；右：膽汁液態培養基；
A：糞鏈球菌；B：空白對照；
4.2.4 轉移到上述培養基後，若能夠生長繁殖，則結果表示為陽性，證實為糞鏈球菌。
4.3 結果與報告：根據上述典型菌落的計數（4.1.3）和確證性試驗為陽性的結果（4.2），計算每250mL水樣中的糞鏈球菌數量，結果以CFU/250mL計。
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