一、培養基用途:
用於空腸彎曲菌的增菌(GB標準)。
二、培養基成分及使用方法:
1.培養基成分
成分 |
含量(g/1000mL) |
動物組織酶解物 |
10.0 |
乳白蛋白水解物 |
5.0 |
酵母浸粉 |
5.0 |
氯化鈉 |
5.0 |
α-酮戊二酸 |
1.0 |
丙酮酸鈉 |
0.5 |
偏亞硫酸氫鈉 |
0.5 |
碳酸鈉 |
0.6 |
pH(25℃)7.2±0.2 |
2.使用方法
稱取本品 27.6g,加熱溶解於1000ml蒸餾水中,分裝,每瓶100mL,121℃高壓滅菌15min,冷卻至45-50℃時,每瓶培養基加入5mL無菌裂解脫纖維羊或馬血和1支Bolton肉湯添加劑,混勻,備用。
注:培養基高壓滅菌後有少量沉澱。
三、原理:
動物組織酶解物和乳白蛋白水解物提供碳源、氮源;酵母浸粉提供各種維生素;氯化鈉維持滲透壓;丙酮酸鈉和偏亞硫酸氫鈉能中和培養基的有毒物質,也能增強菌的耐氧性,有助於未死受損細菌細胞的複蘇;α-酮戊二酸提供生長因子,促進空腸彎曲菌的生長;碳酸鈉提供空腸彎曲菌最有利的PH生長環境;Bolton肉湯添加劑中,頭孢呱酮和多黏菌素B抑製革蘭氏陰性菌,萬古黴素和三甲氧苄胺嘧啶乳酸鹽抑製革蘭氏陽性菌,兩性黴素B抑製酵母、黴菌的生長。
四、實驗結果:
按使用方法製備培養基,接種以下質控菌株,在42±1℃微需氧培養24-48h。
質控菌株 |
菌株編號 |
接種量(CFU) |
參比或計 數培養基 |
方法 |
生長情況 |
其他特征 |
空腸彎曲菌 |
ATCC33291 |
10-100 |
無抗生素CCD |
半定量 |
在CCD上>10CFU |
在CCD上菌 落呈灰白色 |
大腸埃希氏菌 |
ATCC25922 |
1000-5000 |
TSA |
半定量 |
在TSA上<100CFU |
/ |
金黃色葡萄球菌 |
ATCC6538 |
1000-5000 |
TSA |
半定量 |
在TSA上<100CFU |
/ |
由於該培養基加入脫纖維羊血或馬血後培養基顏色較深,難以觀察試管中是否有菌生長,所以用無抗生素CCD和TSA檢驗是否有菌生長。
圖1 Bolton肉湯微生物質控結果
a:空白對照,b:空腸彎曲菌,c:大腸埃希氏菌,d:金黃色葡萄球菌
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