一、用途:
用於濾膜法計數飲用水中大腸埃希氏菌和大腸菌群。
二、實驗原理:
MI瓊脂中的蛋白腖可以為細菌生長提供氮、碳和氨基酸。酵母提取物提供微量元素,維生素和氨基酸。乳糖是一種可發酵的碳水化合物碳源。氯化鈉保持滲透平衡。磷酸一鉀和磷酸二鉀具有緩衝作用。十二烷基硫酸鈉和去氧膽酸鈉可抑製革蘭氏陽性細菌。
大腸杆菌產生的β-D-葡萄糖醛酸酶將顯色劑吲哚氧基-β-D-葡萄糖醛酸(IBDG)切割成藍色或靛藍色化合物。大腸菌群產生的β-半乳糖苷酶可裂解氟化物4-甲基傘形酮-β-D-葡萄糖醛酸苷,生產4-甲基傘形酮,一種熒光化合物,當暴露於長波紫外線(366nm)時,可出現熒光反應。瓊脂作為固化劑。
頭孢磺啶鈉可抑製革蘭氏陽性細菌和一些非大腸菌群革蘭氏陰性細菌生長。
三、培養基配方(g/L):
略
四、試驗方法:
1、稱取本品 36.5g,加熱溶解於1000ml 蒸餾水中,分裝三角瓶,每瓶 200ml,121℃高壓滅菌 15min,冷至 50℃左右時,每瓶加入一支頭孢磺啶鈉(1mg/支),混勻,傾入無菌平皿,備用。
2、製備質控菌液。
3、選擇合適稀釋度的目標菌質控菌液0.1ml,使用膜進行接種過濾技術,每一稀釋度接種兩個平板。
4、35±2℃下培養20-24小時,記錄實驗結果。
五、結果觀察與解釋
接種以下質控菌株,在35±2℃下培養20-24小時:
質控菌株 |
菌株編號 |
接種量(CFU) |
生長情況 |
其他特征 |
大腸埃希氏菌 |
ATCC25922 |
10-100 |
+++ |
藍色菌落,有熒光 |
鼠傷寒沙門氏菌 |
ATCC14028 |
10-100 |
+++ |
無色菌落無熒光 |
金黃色葡萄球菌 |
ATCC6538 |
100-1000 |
/ |
抑製 |
產氣腸杆菌 |
ATCC13048 |
10-100 |
+++ |
無色菌落,有熒光 |
陰溝腸杆菌 |
ATCC23355 |
10-100 |
+++ |
無色菌落,有熒光 |
圖1-2 MI培養基微生物質控結果
六、注意事項
本培養基僅為細菌鑒定的一部分,需做其他補充試驗。
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