一、試驗原理:
用於分離培養病原性金黃色葡萄球菌。
蛋白腖和牛肉粉提供氮源、維生素和生長因子;D—甘露醇為可發酵糖類;7.5%濃度氯化鈉可抑製除葡萄球菌外的大部分微生物的生長;瓊脂是培養基的凝固劑;酚紅為pH指示劑,金黃色葡萄球菌可分解培養基中的甘露醇產酸,使菌落周圍變黃,並能降解卵黃中的卵磷脂使菌落產生暈圈。
二、培養基配方(g/L):
蛋白腖 |
10.0 |
D-甘露醇 |
10.0 |
牛肉粉 |
2.5 |
氯化鈉 |
75.0 |
酚紅 |
0.025 |
瓊脂 |
15.0 |
pH 7.4±0.2 25℃ |
三、試驗方法:
粉體裝培養基的使用:
1. 稱取本品112.5g,加熱攪拌溶解於1000ml蒸餾水中,煮沸1分鍾,121℃高壓滅菌15分鍾,待培養基冷卻至45-50℃時,無菌操作,加入50%卵黃乳液30ml,搖勻,傾入無菌平皿,備用。
2. 製備質控菌液。
3. 選擇合適稀釋度的質控菌液0.1ml,均勻塗布於平板上,每一稀釋度接種兩個平板。用1μL接種環取非目標菌質控菌液1環,將接種環接觸容器邊緣3次去除多餘液體,在平板表麵劃六條平行直線,同時接種兩個平板。
4. 36±1℃需氧培養24-48小時,記錄實驗結果。
四、結果觀察與解釋
接種以下質控菌株,36±1℃需氧培養24-48小時:
質控菌株 |
菌株編號 |
接種量(CFU) |
參比或計數培養基 |
方法 |
質控評定標準 |
其他特征 |
大腸埃希氏菌 |
ATCC25922 |
/ |
/ |
半定量 |
G≤1 |
/ |
傷寒沙門氏菌 |
ATCC14028 |
/ |
/ |
G≤1 |
/ |
|
金黃色葡萄球菌 |
ATCC6538 |
20-200 |
TSA |
定量 |
PR≥0.7 |
黃色菌落,菌落周圍有暈圈 |
金黃色葡萄球菌 |
ATCC25923 |
20-200 |
PR≥0.7 |
黃色菌落,菌落周圍有暈圈 |
||
表皮葡萄球菌 |
CMCC(B)26069 |
20-200 |
PR≥0.7 |
紅色菌落,沒有暈圈 |
|
|
五、注意事項:
本培養基僅為細菌鑒定的一部分,需做其他補充試驗。
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