一、培養基簡介:
硫乙醇酸鹽流體培養基,也稱液體硫乙醇酸鹽培養基(FT),是在有氧條件下培養厭氧菌的一種澄清液體培養基。
《中國藥典》中列出該培養基的配方為:
胰酪腖 |
15.0g |
氯化鈉 |
2.5g |
酵母浸出粉 |
5.0g |
新配製的0.1%刃天青溶液 |
1.0ml |
葡萄糖/無水葡萄糖 |
5.5g/5.0g |
L-胱氨酸 |
0.5g |
瓊脂 |
0.75g |
硫乙醇酸鈉0.5g(或硫乙醇酸0.3ml) |
|
水 |
1000ml |
培養基配方中各成分的作用及原理,可參考
本文主要就《中國藥典》中對該培養基的質量和使用方法上的一些規定進行分析和解讀。
二、關於使用範圍的規定:
《中國藥典》規定:硫乙醇酸鹽流體培養基主要用於厭氧菌的培養,也可用於需氧菌的培養;胰酪大豆腖液體培養基用於真菌和需氧菌的培養。
顧名思義,對於厭氧菌的培養,必須使用硫乙醇酸鹽流體培養基,而對於需氧菌,則有兩種培養基可選用,硫乙醇酸鹽流體培養基和胰酪大豆腖液體培養基,本人認為,對於需氧菌應首選胰酪大豆腖液體培養基,因為硫乙醇酸鹽培養基因為空間有限,裏麵的氧濃度未必能滿足所有需氧菌的生長。尤其是藥品中有些需氧菌可能菌體細胞已經受損,在這種氧氣濃度受限的培養基中未必能準確檢出;另外,培養基中刃天青的存在,也會對細菌的生長有抑製。綜合這兩方麵考慮,為了將藥品中的需氧菌盡可能檢出來,建議最好使用胰酪大豆腖液體培養基。
三、關於氧化層的規定:
《中國藥典》規定:該培養基的裝量與容器高度的比例應符合培養結束後培養基氧化層(粉紅色)不超過培養基深度的1/2。
即分裝硫乙醇酸鹽培養基所用的容器必須有一定的高度,最終目的是為了能夠更好地營造培養基內部的厭氧環境。目前我公司產品有多種規格,幹粉形態、即用型瓶裝和即用型試管裝。其中瓶裝又分別有100mL、200mL和500mL規格,管裝有10mL和7.5mL規格,滿足不同客戶群的需求(如圖1)。
圖1 公司現有的硫乙醇酸鹽流體培養基產品
對於氧化層的高度,2020版《中國藥典》還有如下規定:在供試品接種前,培養基氧化層的高度不得超過培養基深度的1/3(2015版藥典中該項規定為1/5),否則,須經100℃水浴加熱至粉紅色消失(不超過20分鍾),迅速冷卻,隻限加熱一次,並防止被汙染。
正常生產出的硫乙醇酸鹽是有氧化層的,這是有該款培養基的配方特性所決定,並不妨礙試驗人員使用,隻要氧化層滿足相關規定,就能有效地檢出樣品中的厭氧菌。
生孢梭菌和產氣莢膜梭菌在本公司產品中的生長形態如圖2所示。
圖2 液體硫乙醇培養基中厭氧菌的生長狀態
四、有關培養基存放和培養溫度的規定:
製備好的培養基若不即時使用,應置於無菌密閉容器中,在2-5℃避光的環境下保存,並在經驗證的保存期內使用。
除另有規定外,接菌後的硫乙醇酸鹽流體培養基置30-35℃培養。
五、有關對菌種的要求:
對於培養基靈敏度的檢查,《中國藥典》規定菌種培養基靈敏度檢查所用的菌株傳代次數不得超過5代(從菌種保存中心獲得的幹燥菌種為第0代),並采用適宜的菌種保藏技術進行保存和確認,以保證試驗菌株的生物學特性。
相關產品:
注:本文屬betway必威西汉姆联生物原創,未經允許不得轉載。
上一篇:酵母菌的糖發酵試驗-杜氏管發酵法
下一篇:氧化酶試驗的操作方法及注意要點