【原理】
本培養基中含有胰蛋白䏡(Tryptose)、蔗糖(Sac-charose)、石蕊(Litmus)、中性紅(Neutral red)等成分,因此簡稱為TSLN培養基。培養基中的孔雀綠為抑製劑,可抑製大腸杆菌、痢疾杆菌和傷寒杆菌等雜菌的生長。石蕊和中性紅為複合指示劑,可因細菌分解蔗糖產生不同程度的酸或因分解蛋白質而產堿,從而使菌落顯示出不同的顏色。石蕊為酸堿指示劑及氧化還原指示劑,pH範圍5.6~8.3,在酸性時顯粉紅色,中性時淡紫色,堿性時呈藍色,還原時褪色。中性紅pH範圍6.8~8.0,在酸性時為紅色,堿性時呈黃色。此種複合指示劑顯示菌落顏色的敏感性比單一指示劑好,本配方使用量對多殺巴氏杆菌無毒性。硫代硫酸鈉能使紅色菌落鮮明。吐溫80能抑製許多細菌擴張生長。多殺巴氏杆菌在此培養基上因緩慢分解蔗糖,於37℃下培養24~48小時,開始為顯微紅色較小露水珠樣菌落,隨著培養時間的延長,由微紅到玫瑰紅色,在透射光下用擴大鏡觀察菌落邊緣顯紅色或藍綠色熒光。
【成分】
每升蒸餾水中的成分:
胰蛋白䏡(Oxoid)
10g
胰蛋白腖(Oxoid)
5g
酵母浸膏
2g
氯化鈉
5g
蔗糖
10g
硫代硫酸鈉
0.5g
CT吐溫80貯存液
12~25ml
瓊脂粉(日本進ロ分裝)
15g
1%孔雀綠水溶液
1.5ml
2.5%石蕊水溶液
5ml
1%中性紅水溶液
10ml
【製法】
懸浮上述各成分(除孔雀綠,石蕊和中性紅外)於1000ml蒸餾水內,加溫使完全溶解後,調整至pH7.2~7.4再加入孔雀綠、石蕊及中性紅混勻。121℃滅菌15分鍾,冷卻至50℃左右,傾注平皿,製成的培養基,底色為黃棕色。
【用途】
用於分離多殺巴氏杆菌(Pasteurella multocida)
【注意事項】
1.本培養基中如缺少胰蛋白䏡和胰蛋白腖成分,亦可用503型蛋白腖代替,但需在培養基中添加5%的血清方可使多殺巴氏杆菌生長良好。
2.由於市售吐溫含有未酯化的臘肪酸,聚乙二醇和其它副產品,有阻止細菌生長的作用,因此本培養基中使用經活性炭處理(CT)的吐溫80。
下一篇:橋壩式選擇培養基