一、實驗用途及原理:
用途:用於沙門氏菌和誌賀氏菌的分離培養。
原理:牛肉浸粉、肉蛋白腖提供氮源、維生素和生長因子;乳糖為可發酵糖,檸檬酸鈉、檸檬酸鐵為可利用碳源;瓊脂是培養基的凝固劑;中性紅為酸堿指示劑;脫氧膽酸鈉抑製革蘭氏陽性菌的生長。發酵乳糖產酸的細菌菌落為紅色,不發酵乳糖的細菌菌落為無色;瓊脂是培養基的凝固劑。
二、培養基配方(g/L):
牛肉浸粉 |
10 |
肉蛋白腖 |
10 |
乳糖 |
10 |
檸檬酸鈉 |
20 |
檸檬酸鐵 |
1.0 |
脫氧膽酸鈉 |
5.0 |
瓊脂 |
13.5 |
中性紅 |
0.02 |
pH 7.1-7.5 25℃ |
三、實驗方法:
稱取本品69.52克,加熱溶解於1000 mL蒸餾水中,煮沸1分鍾,冷至50℃左右傾入無菌平皿,無需高壓滅菌。
使用前,把製備好的平板放置室溫10-20分鍾。
1、製備質控菌液。
2、將質控菌液塗布或劃線平板。
3、30℃-35℃倒置需氧培養18小時-24小時,記錄實驗結果。
四、結果判定:
質控菌株 |
菌株編號 |
接種量(CFU) |
生長情況 |
其他特征 |
福氏誌賀氏菌 |
ATCC 12022 |
10-100 |
+++ |
無色透明菌落 |
鼠傷寒沙門氏菌 |
ATCC 14028 |
10-100 |
+++ |
無色透明菌落 |
金黃色葡萄球菌 |
ATCC 6538 |
100-1000 |
+++ |
抑製 |
大腸埃希氏菌 |
ATCC 8739 |
/ |
+++ |
粉紅色菌落,有膽鹽沉澱 |
圖1脫氧膽鹽檸檬酸鹽瓊脂培養基微生物質控結果
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