【原理】
細菌L型屬細菌缺壁型,在低滲液體內,水分可通過半透性的細胞膜內滲,常可引起菌體的腫脹而破裂。用高滲而營養豐富的培養基有利於細菌L型的生長。
地龍含有多種氨基酸、碳水化合物、脂類和維生素等,營養極為豐富。黃芪含有蔗糖、數種氨基酸、膽堿,葉酸等。當歸含有大量(40%)的蔗糖、維生素B12和A等物質。因此由地龍、黃芪和當歸等製成的基礎液,製成L880培養基,適用於細菌L型的生長。
【成分及製法】
1. L880基礎液:
先將地龍用自來水浸泡30分鍾,清洗去除泥沙,剪碎後,置2000ml三角燒瓶內,再加入黃芪、當歸及蒸餾水1000ml,煮沸30分鍾,加氯化鈉5g,冷卻後,調整至pH1.5~2.0,加胃蛋白酶0.35g,混勻,37℃溫度消化作用3~4小時。取其上清液或濾液,再補加蒸餾水1000ml。調整至pH8~8.2。121℃滅菌20分鍾,冷藏備。
地龍(幹製)
70g
當歸
2g
黃芪
7g
氯化鈉
5g
蒸餾水
1000ml
L880增菌管:
蛋白腖(日本)
20g
蔗糖
150g
氯化鈉
50g
L880基礎液
1000ml
將上述成分置於燒杯內加熱溶解,調至pH7.4~7.6,分裝,121℃滅菌20分鍾後,置冰箱內備用。
L880瓊脂培養基:
蛋白腖(日本)
20g
氯化鈉
40g
瓊脂
8g
L880基礎液
1000ml
將上述成分置於2000ml三角燒瓶內,加熱溶解,調整至pH7.4~7.6,121℃滅菌20分鍾後,冷至50~60℃,迅速傾注平皿,置冰箱內備用。
【用途】
用於細菌L型的培養、分離和鑒定。
【注意事項】
1.地龍有廣地龍(產於兩廣和沿海一帶)和土地龍(產於內地)等。廣地龍和土地龍,新鮮地龍和幹製地龍,均可用於本培養基,以中藥房取之的幹製廣地龍為宜。
2.L880培養基中僅含中藥地龍,則菌落生長緩慢,細小,且不能形成L型菌落。含有地龍、黃芪和當歸3種成分,則細菌型和L型菌落生長迅速、良好。三者缺一不可。
(開封市公費醫療醫院 袁淑聰、徐永林、李中洋、郭欣供稿)
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