一、試驗原理:
用於真菌的分離檢測。
腦心浸粉、胰酪蛋白腖和蛋白腖提供氮源,維生素和礦物質;葡萄糖提供碳源;氯化鈉維持均衡的滲透壓;磷酸氫二鈉是緩衝劑;瓊脂是培養基的凝固劑。
二、培養基配方(g/L):
腦心浸粉 |
10.0 |
胰酪蛋白腖 |
2.5 |
蛋白腖 |
7.0 |
葡萄糖 |
21.0 |
氯化鈉 |
2.5 |
磷酸氫二鈉 |
1.25 |
瓊脂 |
15.0 |
pH 7.0±0.2 25℃ |
三、試驗方法:
1. 稱取本品59.0g,加熱攪拌溶解於1000ml蒸餾水中,121℃高壓滅菌15分鍾,備用
2. 製備好的平板保存於2-8℃,應避免光線直接照射。幹燥培養基應放置於陰暗幹燥處,室溫保存。
3. 使用前,把製備好的平板放置室溫10-20分鍾。
4. 製備質控菌液
5. 選擇合適稀釋度的質控菌液0.1ml,均勻塗布於平板上,每一稀釋度接種兩個平板。
6. 23-28℃倒置培養基培養48-72小時,記錄實驗結果。
四、結果觀察與解釋
接種以下質控菌株,23-28℃倒置培養基培養48-72小時:
質控菌株 |
菌株編號 |
接種量(CFU) |
參比或計 數培養基 |
方法 |
質控評定標準 |
其他特征 |
白色念珠菌 |
CMCC(F)98001 |
10-100 |
沙氏葡萄 糖瓊脂 |
定量 |
PR≥0.7 |
白色菌落 |
黑曲黴菌 |
CMCC(F)98003 |
10-100 |
PR≥0.7 |
有黑色孢子 |
||
酵母菌 |
CMCC(F)98002 |
10-100 |
PR≥0.7 |
白色菌落 |
圖1 沙氏葡萄糖瓊脂微生物質控結果
備注:a:白色念珠菌,b:黑曲黴菌,c:酵母菌
注:為加強培養基選擇性,每升培養基可加入0.05g氯黴素和0.5g放線菌酮。
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