一、試驗原理:
用於鏈球菌的分離培養。
細菌蛋白腖、牛心浸粉提供氮源、碳源、維生素和生長因子;葡萄糖提供碳源;氯化鈉用於維持細胞滲透壓;碳酸鈉和磷酸氫二鈉提供無機鹽以及作為緩衝劑維持培養基的pH;瓊脂作為培養基的凝固劑。
二、培養基配方(g/L):
細菌蛋白腖 |
20.0 |
牛心浸粉 |
3.1 |
碳酸鈉 |
2.5 |
葡萄糖 |
2.0 |
氯化鈉 |
2.0 |
磷酸氫二鈉 |
0.4 |
瓊脂 |
15.0 |
pH值7.8±0.2(25℃) |
三、試驗方法:
1. 稱取本品45.0 g,加熱溶解於1000 mL蒸餾水中,分裝,121℃高壓滅菌15分鍾,備用。
2. 製備質控菌液;
3. 選擇合適稀釋度的質控菌液100 μL,均勻塗布於待測培養基上,用TSA瓊脂做對照培養基,計算回收率;
4. 放置36±1℃需氧培養24-48小時,記錄試驗結果。
四、試驗結果判斷:
接種以下質控菌株,放置於36±1℃需氧培養24-48小時。
質控菌株 |
菌株編號 |
接種量 (CFU) |
回收率 |
生長情況 |
其他特征 |
溶血性鏈球菌 |
CMCC(B) 32210 |
10-100 |
≥70% |
+++ |
白色小菌落 |
糞鏈球菌 |
ATCC 29212 |
10-100 |
≥70% |
+++ |
白色小菌落 |
金黃色葡萄球菌 |
ATCC 25923 |
10-100 |
≥70% |
+++ |
乳白色大菌落 |
化膿性鏈球菌 |
ATCC 19615 |
10-100 |
≥70% |
+++ |
白色小菌落 |
圖1 Todd-Hewitt瓊脂培養基微生物質控結果
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