一、用途及原理
該培養基用於副溶血性弧菌的糖類分解試驗。
蛋白腖、牛肉浸粉為細菌生長提供基本營養,30g/L的氯化鈉維持與海水相近的滲透壓,有利於弧菌的生長,溴甲酚紫為酸堿指示劑,酸性條件下為黃色,堿性條件為紫紅色,若細菌可分解相應的糖類產酸,導致培養基pH下降,就會觀察到培養基變黃的現象,即為糖發酵陽性,若細菌不能分解相應的糖產酸,培養基仍為紫紅色。
二、培養基配方(g/L)
蛋白腖 |
10.0 |
牛肉浸粉 |
3.0 |
氯化鈉 |
30.0 |
溴甲酚紫 |
0.04g |
糖(補加) |
10.0 |
pH |
7.0±0.2 |
三、配製方法
稱取本品43.0g,加熱溶解於1000ml蒸餾水中,按1%量加入糖類(如若要做蔗糖發酵試驗,按照10g/L的量添加蔗糖即可),分裝試管,112℃滅菌15min,備用。
注:若要觀察產氣,可在試管中加入小倒管。
四、生長現象及結果觀察
分別在培養基中加入蔗糖和阿拉伯糖,接種以下質控菌株,在36±1℃下培養18-24小時:
質控菌株 |
菌株編號 |
糖發酵 |
接種量/CFU |
生長現象 |
副溶血性弧菌 |
ATCC17802 |
蔗糖 |
>5000 |
陰性,紫色 |
霍亂弧菌 |
非O1 |
蔗糖 |
>5000 |
陽性,變黃 |
溶藻弧菌 |
ATCC33847 |
蔗糖 |
>5000 |
陽性,變黃 |
創傷弧菌 |
ATCC27562 |
蔗糖 |
>5000 |
陰性,紫色 |
副溶血性弧菌 |
ATCC17802 |
阿拉伯糖 |
>5000 |
陽性,變黃 |
霍亂弧菌 |
非O1 |
阿拉伯糖 |
>5000 |
陰性,紫色 |
溶藻弧菌 |
ATCC33847 |
阿拉伯糖 |
>5000 |
陰性,紫色 |
創傷弧菌 |
ATCC27562 |
阿拉伯糖 |
>5000 |
陰性,紫色 |
圖1左側1-4支為蔗糖發酵試驗,5-8支為阿拉伯糖發酵試驗
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