一、用途
用於厭氧亞硫酸鹽還原杆菌的試管計數。
二、原理
蛋白腖提供碳源、氮源、維生素和礦物質;無水亞硫酸鈉可被還原產生硫化氫;瓊脂是培養基凝固劑。鐵屑與培養基中氧氣結合形成一個厭氧環境。
三、培養基成分(g/L)
蛋白腖 |
10.0 |
無水亞硫酸鈉 |
1.0 |
瓊脂 |
20.0 |
此配方可以進行改良或增加營養成分以獲得最佳的結果
四、操作步驟
1、稱取本品31.0g,加熱溶解於1000ml蒸餾水中,分裝試管,每管10-15ml,並與各試管內加入適量的混鐵粉或鐵屑,121℃高壓滅菌20分鍾,備用。
2、製備質控菌液。
3、趁熱將樣品加入試管中,顛倒數次,在沸水或蒸汽櫃中放置15min(加熱過程中也需顛倒試管數次),加熱後迅速用水冷卻試管,待試管內培養基完全凝固後,將試管預熱至50-55℃厭氧培養48h。
五、實驗結果
接種以下質控菌株,50-55℃厭氧培養48小時:
質控菌株 |
菌株編號 |
接種量(CFU) |
生長情況 |
其他特征 |
產氣莢膜梭菌 |
ATCC13124 |
/ |
良好 |
形成黑色球形區域 |
大腸埃希氏菌 |
ATCC25922 |
/ |
良好 |
未變黑 |
注:a:產氣莢膜梭菌;b:大腸埃希氏菌
方法的局限性
本培養基僅為細菌鑒定的一部分,需做其他補充試驗。
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