一、氫氧化細菌和鐵載體的簡介：
氫氧化細菌（Hydrogen-oxidizing bacteria）是一類能通過氧化氫氣獲得能量，固定二氧化碳作為唯一碳源的微生物，土壤中分布廣泛，尤其是豆科植物根際大量存在。氫氧化細菌沒有單獨的分類，多分布在假單胞菌屬、副球菌屬、黃杆菌屬、分支杆菌屬、產堿菌屬、諾卡氏菌屬、醋酸杆菌屬及棒杆菌屬等。絕大部分氫氧化細菌是兼性化能自養型，它們可以自養生長、異養生長、甚至混合營養生長，好氧或兼性厭氧。氫氧化細菌屬於植物根際促生菌，在農作物增產方麵有巨大的應用潛力，所以其各種促生機製的研究已成為熱點，其中分泌鐵載體就是幾種重要的促生機製之一。
鐵載體（siderophore）是一類能特異性結合鐵離子並供給微生物細胞的低分子量物質。鐵元素是微生物生長的必需元素，在缺鐵的環境中微生物會分泌鐵載體螯合鐵離子滿足自身生長需要。目前，常用的鐵載體檢測方法為Schwyn和Neilands發明的通用CAS瓊脂平板法，當細菌產生的鐵載體與由鉻天青S（CAS）、十六烷基三甲基溴化銨（HDTMA）、鐵離子組成的藍色複合物結合後，會奪走鐵離子，使細菌周圍的培養基顏色由藍色變為橘黃色，出現鐵載體分泌圈，有利於判斷細菌是否產生鐵載體。
二、CAS檢測培養基
1. 產品用途：用於細菌鐵載體篩選試驗。
2. 配方（mg/L）：
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鉻天青S（CAS） |
60.5 |
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十六烷基三甲基溴化銨（HDTMA） |
72.9 |
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六水氯化鐵 |
2.645 |
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二水磷酸二氫鈉 |
295.25 |
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十二水磷酸氫二鈉 |
1213.5 |
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氯化銨 |
125 |
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磷酸二氫鉀 |
37.5 |
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氯化鈉 |
62.5 |
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瓊脂 |
9000 |
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pH值6.8±0.1（25℃） |
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三、試驗方法：
1. 稱取本品10.87g，加熱煮沸完全溶解於1000mL蒸餾水中，分裝三角瓶，116℃高壓滅菌30分鍾，冷卻至50℃時，傾入無菌平皿，備用；
2. 用接種環挑取質控菌株新鮮培養物點種到平板上；
3. 放置35℃需氧培養24小時，記錄試驗結果。
四、試驗結果判斷：
接種以下質控菌株，放置於35℃需氧培養24小時。
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質控菌株 |
菌株編號 |
接種量（CFU） |
參比或計數培養基 |
質控結果 |
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銅綠假單胞菌 |
ATCC 9027 |
/ |
/ |
菌落周圍有黃色環 |
圖1 銅綠假單胞菌ATCC 9027在CAS檢測培養基菌落特征
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