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黴菌和酵母菌計數檢驗方法-化妝品安全技術規範(2022年版)



錄入時間:2022-11-30 10:32:51 來源:2022年版化妝品安全技術規範

1.範圍

  本規範規定了化妝品中黴菌和酵母菌數的檢驗方法。

  本規範適用於化妝品中黴菌和酵母菌數的測定。


2.定義

  2.1 黴菌和酵母菌數測定Molds and yeasts count

  化妝品檢樣經過處理,在一定條件下培養後,1g (1mL)檢樣中形成的黴菌和酵母菌總數,藉以判明化妝品被黴菌和酵母菌汙染程度及其一般衛生狀況。

  本方法根據黴菌和酵母菌特有的形態和培養特性,在虎紅培養基上,置28℃±2℃培養5d,計算所生長的黴菌和酵母菌數。


3.儀器和設備

  3.1 恒溫培養箱:28℃±2℃

  3.2 振蕩器。

  3.3 三角瓶:250mL

  3.4 試管:18mm×150mm

  3.5 滅菌平皿:直徑90mm

  3.6 滅菌刻度吸管:10mL1mL

  3.7 量筒:200mL

  3.8 酒精燈。

  3.9 高壓滅菌器。

  3.10 恒溫水浴箱。


4培養基和試劑

  4.1 生理鹽水

  見總則中3.1

  4.2 虎紅(孟加拉紅)培養基

  成分:
蛋白腖
5g

葡萄糖
10g

磷酸二氫鉀
1g

硫酸鎂(無水)
0.5g

瓊脂
20g

1/3000虎紅溶液(四氯四碘熒光素)
100mL

蒸餾水加至
1000mL

氯黴素
100mg
  製法:將上述各成分(除虎紅外)加入蒸餾水中溶解後,再加入虎紅溶液。分裝後,121℃高壓滅菌20min,另用少量乙醇溶解氯黴素,溶解過濾後加入培養基中,若無氯黴素,使用時每1000mL加鏈黴素30mg


5操作步驟

  5.1 樣品稀釋

  見菌落總數測定中5.1

  5.2 取1:101:1001:1000的檢液各2mL,分別注入2個滅菌平皿內,每皿1mL,注入融化並冷卻至45℃±1℃左右的虎紅培養基,充分搖勻。凝固後,翻轉平板,置28℃±2℃培養5d,觀察並記錄。另取一個不加檢液的滅菌空平皿,加入約15mL虎紅培養基,待瓊脂凝固後,翻轉平皿,置28℃±2℃培養箱內培養5d,為空白對照。

  5.3 計算方法:先點計每個平板上生長的黴菌和酵母菌菌落數,求出每個稀釋度的平均菌落數。判定結果時,應選取菌落數在5CFU~50CFU範圍之內的平皿計數,乘以稀釋倍數後,即為每g(或每mL)檢樣中所含的黴菌和酵母菌數。其他範圍內的菌落數報告應參照菌落總數的報告方法報告之。

  5.4 每g(或每mL)化妝品含黴菌和酵母菌數以CFU/g (mL)表示。

 

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