初級產品階段的微生物樣品采集

  初級產品階段的采樣用於監測動物中可能攜帶的人畜共患病原體的傳播途徑,樣本應從動物及其環境中獲取,包括在運輸過程中和在屠宰場中,此時采樣計劃(包括方法、數量、重量和體積等),應根據初級產品的性質和需要采樣的對象而變化。

① 農場環境下的采樣

  對消毒後的動物房進行采樣時,最好在所有表麵幹燥後再進行,以最大限度地減少消毒劑對采集樣品過程中的幹擾。若已知使用的消毒劑,應將適當的中和劑添加到相關的稀釋劑中。樣品應在采樣當天進行培養。

  環境表麵采樣可使用適宜的織物拭子,棉簽等,為了最大限度獲得微生物,拭子棉簽等應盡可能大,擦拭足夠大的麵積,以確保所有表麵材料都被覆蓋到。

  對各種類型的地麵,可穿著靴襪走動采樣。采樣前用飲用水或其他合適的稀釋劑潤濕靴襪。對大空間的代表性區域進行采樣時,例如在家禽舍中,每間禽舍至少需要100步,包括房屋的全長和寬度﹐以及任何零散或條塊的地區,並確保包括糞便積聚區域或潮濕的垃圾區域。拖拭子可以與靴襪在相同的情況、相同的采樣原則下使用。

  垃圾樣品通常不具有代表性,最好收集一個大樣本,如從整個房屋內至少60個不同的地方收集總量約2kg重的樣品。糞便樣品通常可以收集5個～20個單獨的糞便﹐也可采集傳送帶﹑禽舍的地板、飼料坡道等處的混合糞便,應確保各處所采集的樣品能代表性反應動物群體的狀態。塵樣可使用手套或合適的無菌硬刷,刮刀收集,也可使用潮濕的織物拭子從表麵收集薄層的灰塵,避免在靠近飼料輸送係統的地方取樣,因為飼料粉塵顆粒在此處的灰塵中積累過多,不要從最近使用過的加熱器或燈具上收集灰塵,因為熱量和光線會降低樣品中細菌的含量。

  采集的水樣應包括水中的沉澱物,還應包括采集自飲水係統的拭子。可從鍾形槽或槽式飲水係統中舀取沉澱物﹐並使用幹的織物拭子在槽與水容器之間的界麵周圍擦拭采樣。采集牧場動物飲用的天然水源時,樣本最好是河流中緩慢移動的水或溪流彎曲處的沉積物和積聚在泉水深層帶中的沉積物。對主要供水管道進行采樣時,最好收集較大量的水(如5L～10L) ,或將管道過濾器留置在供水係統中並定期取出進行檢測,或在生物體較易附著的水箱中懸放無菌海綿或棉塞,待1天～2天後取出進行培養。

  液體清除係統,如排水溝或水道采樣可采用Moore's排水拭子,將其錨定在排水管或液體廢物處理管道中5天～7天,然後取下進行培養。

  對奶牛場,牛的健康狀況檢查采樣采用繩拭子,即將無菌繩索懸掛在飼料和水槽的正上方,牛隻會用它擦拭及咀嚼,從而將細菌轉移到繩索上24h後取下送檢。通常位於擠奶設備和散裝罐之間以除去牛奶中的異物的一次性過濾器,也可用於農場的微生物狀況和衛生標準評估。

② 對動物的采樣

  對農場動物采樣通常需要對動物進行約束,當從動物的直腸﹐泄殖腔或鼻拭子采樣時,應注意避免對動物造成傷害,同時最大限度地提高拭子上對樣本采集的采集率。新鮮糞便應從地板或從動物的直腸內采取。皮膚,皮毛或羽毛的采樣使用由織物片組成的濕潤的大拭子連續擦拭動物的背部或其他受汙染區域(每塊拭子至多擦拭5隻動物)來獲得。

  對屠宰動物的采樣包括直腸內容物、盲腸內容物或完整盲腸(對家禽﹐采集的樣品最好是完整的盲腸;對豬和其他物種,可在盲腸的盲端捆紮並送到實驗室,或對盲腸外部仔細消毒後現場采集內容物)、腸係膜淋巴結和扁桃體。

③ 孵化場的采樣

  對(禽類)孵化場的采樣主要檢測目的是沙門氏菌。對孵化籃內襯采樣盡可能選取麵積大的襯墊,總計約1m²。將內襯小心收集到無菌袋中,並盡可能多地保留其黏附的物質。若有蛋殼被壓碎並殘留在內襯時,也應包含在采樣中。盡可能從多的孵化籃內收集孵化後蛋的破殼,將其收集在一個大袋子內。孵化後殘留的絨毛樣品更具有檢測參考價值,可使用手套或織物拭子采集孵化場地麵上的絨毛,最好收集幹燥的,特別是積累在孵化器的空氣提取管中的樣本。

  收集新孵出的幼雛的早期腸道排泄出的胎糞樣本,直到獲得來自至少250隻幼雛的胎糞樣品。最佳樣本數應該不低於300,從而可以可靠地檢測出大於等於1%的胎糞汙染。

  對未能孵化的幼雛胚胎采樣,可檢測由母體垂直傳播的沙門氏菌。由於蛋仍然完好無損,因此胚胎(蛋)可作為飼養雞群中的沙門氏菌感染程度的指標。通常,至少需有60個雞蛋送往實驗室。從胚胎(蛋)中的內髒和卵黃囊進行無菌采樣並收集。對被淘汰的幼雛,即由於性別或身體缺陷被認為是不適合飼養的活體幼雛采樣,類似於死胎樣品的抽樣檢測程序。通常送往實驗室的幼雛至少60隻。

  對送往養殖場的幼雛,采樣應該盡量在幼雛送入禽舍前進行,采集放在裝有幼雛盒子底部的墊紙作為樣品。采樣應小心謹慎,盡量減少來自禽舍或采樣者手部帶來的汙染。每個樣本群中至少包含5個幼雛盒的樣品,樣本的總麵積至少為1m²,放於無菌塑料袋中送往實驗室。

④ 動物運輸車輛、模塊和箱子的采樣

  運輸工具與任何表麵一樣,采樣的麵積越大,采集和檢測的獨立樣品的數量越多,檢測到目標微生物的可能性就越大。

  對大型動物運輸車輛,大號的手持織物拭子或靴子在適當的環境情況下可用於對地板表麵殘留的糞便進行采樣。采樣點應該包括地板所有的主要相關部分。

  對家禽的運輸條板箱及模塊,在運輸車輛的板條箱和地板上采集糞便殘留物可用於評估屠宰批次的汙染可能性。最好對多個板條箱的地麵進行采樣。應注意不同批次之間使用的采樣設備應消毒,避免交叉汙染。

  動物運輸完成後,相關車輛和設備應該立刻進行清洗和消毒,可使用手持織物拭子盡可能全麵地對車輛內與動物接觸的部分,包括任何通風設備進行采樣。為評估車輛仍然攜帶汙染的可能,擱腳板﹑輪拱和表麵材料均可進行采樣。

上一篇：微生物的概念及特征

下一篇：微生物學發展史概要（一）