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LBS瓊脂的試驗方法以及現象

李昊睿
錄入時間:2022-12-12 10:25:24 來源:青島betway必威西汉姆联生物

一、試驗原理:

  胰酪蛋白腖、牛酵母浸粉提供氮源、維生素、生長因子;葡萄糖提供碳源;磷酸氫二鉀為緩衝劑;檸檬酸鐵銨、硫酸鎂、硫酸錳、硫酸亞鐵、吐溫-80和乙酸鈉為培養各種乳酸菌提供生長因子,吐溫80為乳酸杆菌提供所需的代謝脂肪酸;檸檬酸鐵銨和乙酸鈉能夠抑製一些雜菌的生長,包括鏈球菌、黴菌和除乳酸杆菌外的大多數口腔微生物菌群;加入乙酸,使pH值降低,抑製了其它細菌的生長,有利於乳酸杆菌的分離;瓊脂是培養基的凝固劑。


二、用途:

  用於乳酸杆菌的分離培養。


三、培養基配方(g/L):

酵母浸粉

5.0

胰酪蛋白腖

10.0

磷酸二氫鉀

6.0

硫酸亞鐵

0.034

硫酸鎂

0.575

葡萄糖

20.0

乙酸鈉

25.0

檸檬酸銨

2.0

硫酸錳

0.12

瓊脂

15.0

pH 5.5±0.2   25℃


四、試驗方法:

  1.稱取本品84.0g,再吸取吐溫80 1ml和冰乙酸1.3ml,加熱攪拌溶解於1000ml蒸餾水中,當日使用,無需高壓滅菌。次日使用,需118℃高壓滅菌15分鍾。傾注無菌空平皿備用。

  注:該培養基溶解後有少量沉澱。

  2.製備質控菌液。

  3.選擇合適稀釋度的目標菌質控菌液0.1ml,均勻塗布於平板上,每一稀釋度接種兩個平板。

  4.36±1℃培養24-48小時,記錄實驗結果。


五、結果觀察與解釋

  接種以下質控菌株,在36±1℃培養24-48小時:

質控菌株

菌株編號

接種量(CFU)

參比或計數培養基

方法

質控評定標準

其他特征

嗜酸乳杆菌

CICC6005

20-200

MRS培養基

定量

PR≥0.7

白色突起菌落

植物乳杆菌

ATCC8014

20-200

MRS培養基

定量

PR≥0.7

白色突起菌落


植物乳杆菌ATCC8014
嗜酸乳杆菌CICC6005

植物乳杆菌ATCC8014

白色凸起菌落

嗜酸乳杆菌CICC6005

白色凸起菌落

圖1 LBS瓊脂微生物質控結果



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注:本文屬betway必威西汉姆联生物原創,未經允許不得轉載。


 

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