一、試驗原理:
胰酪蛋白腖、牛酵母浸粉提供氮源、維生素、生長因子;葡萄糖提供碳源;磷酸氫二鉀為緩衝劑;檸檬酸鐵銨、硫酸鎂、硫酸錳、硫酸亞鐵、吐溫-80和乙酸鈉為培養各種乳酸菌提供生長因子,吐溫80為乳酸杆菌提供所需的代謝脂肪酸;檸檬酸鐵銨和乙酸鈉能夠抑製一些雜菌的生長,包括鏈球菌、黴菌和除乳酸杆菌外的大多數口腔微生物菌群;加入乙酸,使pH值降低,抑製了其它細菌的生長,有利於乳酸杆菌的分離;瓊脂是培養基的凝固劑。
二、用途:
用於乳酸杆菌的分離培養。
三、培養基配方(g/L):
酵母浸粉 |
5.0 |
胰酪蛋白腖 |
10.0 |
磷酸二氫鉀 |
6.0 |
硫酸亞鐵 |
0.034 |
硫酸鎂 |
0.575 |
葡萄糖 |
20.0 |
乙酸鈉 |
25.0 |
檸檬酸銨 |
2.0 |
硫酸錳 |
0.12 |
瓊脂 |
15.0 |
pH 5.5±0.2 25℃ |
四、試驗方法:
1.稱取本品84.0g,再吸取吐溫80 1ml和冰乙酸1.3ml,加熱攪拌溶解於1000ml蒸餾水中,當日使用,無需高壓滅菌。次日使用,需118℃高壓滅菌15分鍾。傾注無菌空平皿備用。
注:該培養基溶解後有少量沉澱。
2.製備質控菌液。
3.選擇合適稀釋度的目標菌質控菌液0.1ml,均勻塗布於平板上,每一稀釋度接種兩個平板。
4.36±1℃培養24-48小時,記錄實驗結果。
五、結果觀察與解釋
接種以下質控菌株,在36±1℃培養24-48小時:
質控菌株 |
菌株編號 |
接種量(CFU) |
參比或計數培養基 |
方法 |
質控評定標準 |
其他特征 |
嗜酸乳杆菌 |
CICC6005 |
20-200 |
MRS培養基 |
定量 |
PR≥0.7 |
白色突起菌落 |
植物乳杆菌 |
ATCC8014 |
20-200 |
MRS培養基 |
定量 |
PR≥0.7 |
白色突起菌落 |
|
|
植物乳杆菌ATCC8014 白色凸起菌落 |
嗜酸乳杆菌CICC6005 白色凸起菌落 |
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