(6）有生物抑製效果的產品
對本身含有生物抑製性物質的食品(如洋蔥粉、大蒜、牛至、辣椒.某些茶和咖啡等),或加工過程中原有微生物可能受損或受抑製的產品(如高度鹽漬的產品),應使用以下的幾種特殊的製備程序來降低檢測前樣品的抗菌活性,且首次檢測中,應使用添加-回收試驗來驗證所選擇的中和過程的有效性。
① 使用更大的稀釋倍數或增菌液量,例如肉桂和牛至宜采用1∶100稀釋度﹐丁香宜采用1∶1000的稀釋度。
② 在緩衝蛋白腖水(BPW)中加入亞硫酸鉀,最終濃度為0.5%。
③ 在37℃±10℃下使用特定稀釋劑以助產品溶解,或采用較高稀釋度來增加溶解度﹐例如維生素混物宜采用l:50稀釋度。
④ 對含超過10%鹽(NaCI)的產品,應使用較高稀釋度以確保初始懸浮液中的鹽總濃度(不包括稀釋劑或濃縮液中的任何鹽含量)不超過1%。
(7)多組分的產品
多組分產品係指包含多件不同食品的產品,如三明治等。采樣時應根據不同組分所占的比例構成實驗室樣品。將實驗室樣品整體進行均質,以取得均質性的試驗樣品以及試料。若需進一步磨碎或切碎,時間不應超過1min,以免這些操作可能引起的過熱。
(8）預包裝的產品
送交實驗室的產品包裝可有多種多樣的類型,此處考慮兩種狀況:可以用剪刀、刀或手術刀無菌操作去除的軟包裝;需使用合適的工具在無菌條件下打開硬質包裝,如罐頭、玻璃容器等。
為防止外界汙染,預包裝產品打開前後均應無菌操作。若打開和去除封口的操作沒有引人外部汙染的風險﹐則無需對外包裝進行清洗和消毒。可使用溫和洗滌劑對硬質或半硬質的包裝表麵進行水洗,然後用潔淨的毛巾或吸水紙擦幹。但當包裝較薄且可能因浸水而損壞時(如薄膜包裝或軟質包裝的食品),則應省略清洗的步驟,直接進行消毒。消毒時應小心仔細地用75%(體積分數)酒精或消毒濕巾對產品外包裝進行擦拭,以避免開封時可能的汙染。薄膜包裝的產品應放置於托盤上,揭開薄膜,暴露產品以備製樣。對於氣調包裝或真空包裝的食品,應使用無菌的刀、手術刀、剪刀以及鉗子或手術鑷等器具打開。
(9)表麵采樣的樣品(拭子或其他)
在稀釋液中混合拭子或其他塗抹用材料如海綿、紗棉墊等,可使用玻璃小珠,以使吸附在采樣材料上的微生物在液體中充分懸浮。此處使用的稀釋液應與用於樣品浸濕和(或)運輸時的相同。此懸浮稀釋液即為初始稀釋液,並應予以記錄。例如,一個采集自25cm2表麵的塗抹拭子加人到總量25mL的稀釋液中, 1ml稀釋液即代表了lcm2表麵的微生物。
根據ISO 18593中規定,在消毒後的表麵進行采樣時,應關注消毒劑的殘留,必要時應先中和消毒劑或添加劑的殘留。若使用的消毒劑種類未知,可采用通用的中和劑[通用中和劑成分:大豆卵磷脂3.0g;吐溫80 30.0g;L-組氨酸1.0g;硫代硫酸鈉(Na2SO4·5H2O)7.8g;磷酸氫二鈉(Na2HPO4 ·12H2O)100.8g;水1000mL。將以上成分溶解於水中進行加熱,121℃高壓滅菌15min ,可冷藏保存於密閉避光容器中3個月,該中和劑一般以10倍稀釋後使用]。但需注意,中和劑可能造成目標微生物應激，並對競爭性菌群的生長具有不可預知的影響，從而導致假陰性結果。
當預估存在消毒劑殘留時，稀釋樣液和接觸平板的培養基中應加入適當中和劑，以防止消毒劑對微生物的生長產生抑製作用。中和培養基的基礎成分常為緩衝蛋白腖水或蛋白腖生理鹽水，或是其他適當的稀釋液[如1∶4濃度的林格液 (Ringer's solution)、pH7.5的磷酸鹽緩衝液,1g/L的蛋白腖水溶液]。實際上並沒有適於所有消毒劑的中和劑，一般情況下,吐溫80(聚山梨醇酯80)和卵磷脂用於中和季銨化合物和醇類消毒劑；硫代硫酸鹽用於中和含鹵素和酚類的消毒劑;過氧化氫酶或過氧化物酶用作中和含過氧化物的消毒劑劑,在25℃,pH7.0±0.2條件下，一個單位的酶每分鍾可催化降解1μmoI的過氧化氫。多數情況下所使用中和成分見表3-4。按所需濃度添加到1g/L蛋日腖溶液和0.85%NaCl溶液中,分裝試管或瓶,121℃滅菌15min備用。
(10）其他特殊性狀產品(包括但不僅限於)
① 為改善因食品生產加工和儲存中菌體受損的微生物的複蘇采用的複蘇手段。
② 在某些產品(如穀物)中檢測指定微生物(如酵母和黴菌)時需要特殊的均質程序和均質時間。
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