一、試驗用途及原理：
用於食品和其他物質中梭菌的培養和計數。
胰酪蛋白腖，牛肉浸粉，蛋白腖，可溶性澱粉，酵母浸粉和L-半胱氨酸鹽提供氮源、維生素和生長因子；葡萄糖提供碳源；刃天青是氧化還原指示劑；醋酸鈉可抑製革蘭氏陰性菌；檸檬酸鐵銨和亞硫酸鈉是硫化氫指示劑；瓊脂是培養基凝固劑。
二、培養基配方（g/L）：
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胰酪蛋白腖 |
5.0 |
|
蛋白腖 |
5.0 |
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牛肉浸粉 |
8.0 |
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可溶性澱粉 |
1.0 |
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酵母粉 |
1.0 |
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葡萄糖 |
1.0 |
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L-半胱氨酸鹽酸鹽 |
0.5 |
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醋酸鈉 |
5.0 |
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刃天青 |
0.002 |
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檸檬酸鐵銨 |
0.5 |
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亞硫酸鈉 |
0.75 |
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瓊脂 |
15.0 |
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pH 7.6±0.2 25℃ |
|
三、試驗方法：
粉體裝培養基的使用：
1. 稱取本品 42.75g，加熱攪拌溶解於1000ml蒸餾水中，分裝， 121℃高壓滅菌15分鍾，備用。
2. 製備質控菌液。
3. 吸取合適稀釋度質控菌液1ml加入無菌平皿內，每個稀釋度做兩個平行。每個平皿傾注冷卻至50℃的待測培養基15ml，緩慢旋轉平皿，使質控菌液和培養基充分混勻。
上述瓊脂平板凝固後，再加入10ml冷卻至50℃的待測培養基均勻覆蓋平板表層。
4. 待瓊脂凝固後，正置於厭氧培養裝置內36±1℃培養24-48小時，記錄實驗結果。
四、結果觀察與解釋
接種以下質控菌株，正置於厭氧培養裝置內36±1℃培養24-48小時：
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質控菌株 |
菌株編號 |
接種量(CFU) |
參比或計數培養基 |
方法 |
質控評定標準 |
其他特征 |
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產氣莢膜梭菌 |
ATCC13124 |
20-200 |
TSC |
定量 |
PR≥0.7 |
黑色菌落 |
圖1-1 強化梭菌鑒別瓊脂(DRCA)微生物質控結果
五、注意事項
本培養基僅為細菌鑒定的一部分，需做其他補充試驗。
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