一、試驗用途及原理
本培養基用於糞腸球菌選擇性分離培養。
䏡腖、酵母浸粉提供氮源、維生素和生長因子;麥芽糖、乳糖為可發酵糖類;甘油磷酸鈉為培養基碳源,也起到一定的緩衝作用;氯化鈉維持細菌平衡的滲透壓;疊氮鈉可抑製革蘭氏陰性菌生長;溴甲酚紫為指示劑染料;瓊脂是凝固劑。糞腸球菌能將TTC(氯化三苯基四氮唑)還原成一種酸性的偶氮染料,顯示為深紅色菌落。
二、培養基配方(g/L)
䏡腖 |
10.0 |
麥芽糖 |
20.0 |
酵母浸粉 |
10.0 |
甘油磷酸鈉 |
10.0 |
氯化鈉 |
5.0 |
乳糖 |
1.0 |
溴甲酚紫 |
0.015 |
疊氮鈉 |
0.4 |
TTC |
0.1 |
瓊脂 |
13.0 |
pH7.3±0.2(25℃) |
三、試驗方法
1、稱取本品70.0 g,加熱溶解於1000 mL蒸餾水中,煮沸5分鍾,冷至50℃左右,傾入無菌平皿,備用。
2、製備菌種懸液,接種到糞腸球菌瓊脂培養基上。
3、放置於36℃±1℃恒溫培養箱中,需氧培養48 h。
四、質控結果
接種以下質控菌株,放置36℃±1℃恒溫培養箱中,需氧培養48 h。菌株劃線培養結果見圖1,菌株塗布培養結果見圖2。
質控菌株 |
菌株編號 |
接種量(CFU) |
回收率 |
生長情況 |
其他特征 |
糞腸球菌 |
ATCC 29212 |
10-100 |
≥50% |
+++ |
淡紅色小菌落 |
大腸埃希氏菌 |
ATCC 25922 |
/ |
/ |
- |
抑製 |
鼠傷寒沙門氏菌 |
ATCC 14028 |
/ |
/ |
- |
抑製 |
金黃色葡萄球菌 |
ATCC 25923 |
/ |
/ |
- |
抑製 |
圖1 糞腸球菌瓊脂培養基的微生物質控結果(劃線培養)
圖2 糞腸球菌瓊脂培養基的微生物質控結果(塗布培養)
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