可可中含的花青素可能為生物抑製因子,而牛奶能中和可可及其製品的殺菌作用,因此宜將UHT奶或滅菌的含10%脫脂奶粉的複原奶液用作檢測重要致病菌(沙門氏菌和產誌賀樣毒素的大腸埃希氏菌STEC)的預增菌肉湯。在其他項目的檢測中,緩衝蛋白腖水常被用作通用的稀釋劑。對於可可粉及其他可能由於熱加工不充分而可能被革蘭氏陽性菌高度汙染的樣品,在250mL的初始懸浮液中添加0.45ml1%(質量濃度)煌綠溶液﹐可有效減少此類細菌在非選擇性增菌期間對低水平的革蘭氏陰性目標菌的生長競爭。而是否需應用這種處理方式取決於樣品的類型和實驗室的經驗。
製備時,應先將稀釋劑預熱至37℃~40℃。稱取試料(如25g)裝入無菌塑料袋中,加入加熱的稀釋劑(如225mL)以達到1:10初始懸浮液,並立即手動搖勻。將懸浮液在實驗室環境溫度(18℃～27℃)下放置2min~30min溶化,然後在蠕動式均質器中充分混合60s±5s。當檢測大塊的巧克力或其他不易粉碎的可可物質時,可能需要先在42℃～47℃之間將巧克力適當的融化,但不要超過必要的時間。對於含>20%脂肪的巧克力產品,除非產品內已經含有足夠的乳化劑,否則需在稀釋液中加入吐溫80或其他乳化劑。
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