一、培養基用途:
用於細菌鳥氨酸脫羧酶試驗。
二、原理:
某些細菌可產生賴氨酸脫羧酶,使鳥氨酸脫去羧基,生成腐胺,從而使培養基變堿性並通過指示劑變色來觀察。脫羧酶是適應酶或稱誘導酶,對底物有特異性,在無相對氨基酸的培養基中不產生此酶,並且需要酸性環境和適宜溫度。故在培養基中加入葡萄糖,使細菌發酵葡萄糖產酸,以利於脫羧酶的產生。氨基酸的分解是在厭氧條件下進行,故在培養基表麵加液體石蠟。由於細菌發酵葡萄糖產酸,在培養初期培養基和對照培養基呈黃色,繼續培養時,若氨基酸經脫羧或水解產生胺類則培養基變堿,呈紫色或紫紅色,即為陽性反應;如至培養末期培養基如同對照管一樣均呈黃色,則判為陰性反應。
三、培養基成分
成分 |
含量(g/L) |
蛋白腖 |
5.0 |
鳥氨酸 |
5.0 |
葡萄糖 |
1.0 |
酵母浸粉 |
3.0 |
溴甲酚紫 |
0.016 |
pH 6.8±0.1 25℃ |
四、操作方法
1、用磨砂輪在安瓿瓶頸部劃線一圈,掰開待用;傾注平皿備用。
2、將標準儲備菌株接種到非選擇性肉湯中或采用其他製備方法,製備成5 McFarland濁度(約109CFU/ml)的菌懸液;
3、吸取0.05ml-0.08ml(約1-2滴)菌懸液至鳥氨酸脫羧酶生化管和氨基酸脫羧酶試驗對照生化管,36±1℃培養24±2h後,觀察試驗結果。
五、實驗結果
質控菌株 |
菌株編號 |
生長情況 |
其他特征 |
福氏誌賀氏菌 |
ATCC12022 |
+++ |
陰性,黃色 |
宋內誌賀氏菌 |
CMCC(B)51592 |
+++ |
陽性,紫色 |
痢疾誌賀氏菌 |
CMCC(B)51252 |
+++ |
陰性,黃色 |
大腸埃希氏O157菌 |
ATCC35150 |
+++ |
陽性,紫色 |
阪崎腸杆菌 |
ATCC29004 |
+++ |
陽性,紫色 |
鼠傷寒沙門氏菌 |
ATCC14028 |
+++ |
陽性,紫色 |
普通變形杆菌 |
CMCC(B)49027 |
+++ |
陰性,黃色 |
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