一、用途及試驗原理：
該培養基用於釀造和工業發酵過程中細菌、酵母菌和黴菌培養。
胰蛋白腖和酵母浸粉提供微生物生長所需的碳氮源、維生素和生長因子；葡萄糖作為可發酵的糖類；磷酸二氫鉀是培養基pH緩衝劑；氯化鉀、氯化鈣、硫酸鎂和三氯化鐵提供微生物生長所需的離子；溴甲酚綠為培養基的酸堿指示劑；瓊脂為培養基的凝固劑。
二、培養基配方（g/L）：
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胰蛋白腖 |
5.0 |
|
酵母浸粉 |
4.0 |
|
葡萄糖 |
50.0 |
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磷酸二氫鉀 |
0.425 |
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氯化鉀 |
0.125 |
|
氯化鈣 |
0.125 |
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硫酸鎂 |
0.0025 |
|
三氯化鐵 |
0.0025 |
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溴甲酚綠 |
0.022 |
|
瓊脂 |
20.0 |
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pH值5.5-5.8（25℃） |
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三、試驗方法：
1. 稱取本品80.0 g，加熱溶解於1000 mL蒸餾水中，分裝，121℃高壓滅菌15分鍾，待冷卻至50℃-55℃傾入無菌平皿，備用。
2. 10倍梯度稀釋法製備質控菌株菌懸液。
3. 取100 μL質控菌液塗布接種於待測培養基和TSA上。
4. 放置於30℃-35℃需氧培養48 h-72 h，觀察試驗結果。
四、試驗結果判斷：
接種以下質控菌株，放置於30℃-35℃需氧培養48 h-72 h，試驗結果如圖1所示。注：回收率計算時，用TSA瓊脂做對照培養基。
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質控菌株 |
菌株編號 |
接種量（CFU） |
回收率 |
生長情況 |
其他特征 |
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酵母菌 |
ATCC 18700 |
10-100 |
≥70% |
+++ |
白色菌落 |
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白色念珠菌 |
CMCC(F) 98001 |
10-100 |
≥70% |
+++ |
白色菌落 |
|
大腸埃希氏菌 |
ATCC 25922 |
10-100 |
≥70% |
+++ |
白色至淡黃色菌落 |
|
傷寒沙門氏菌 |
ATCC 14028 |
10-100 |
≥70% |
+++ |
白色至淡黃色菌落 |
|
黑曲黴 |
CMCC(F) 98003 |
10-100 |
≥70% |
+++ |
有黑色孢子 |
圖1 WLN培養基微生物質控結果
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