一、簡介
在實際工作中，經常有人將VRBA和VRBGA混淆，甚至有人認為兩者是一種培養基，在購買、使用過程中造成錯誤。本文主要對這兩種培養基的使用和原理等方麵做出詳細說明，並對相關問題進行探討。
二、比較
兩種培養基的異同情況如表1。
表1 VRBA和VRBGA的比較表
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比較項目 |
VRBA |
VRBGA |
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中文名字 |
結晶紫中性紅膽鹽瓊脂 |
結晶紫中性紅膽鹽葡萄糖瓊脂 |
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英文 |
Violet Red Bile Agar |
Violet Red Bile Glucose Agar |
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貨號 |
HB0114 |
HB0176-4 |
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用途 |
用於大腸菌群的固體平板檢測 |
用於腸杆菌科的分離培養 |
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成分 (g/L) |
酵母浸粉 3.0 蛋白腖 7.0 氯化鈉 5.0 乳糖 10.0 3號膽鹽 1.5 結晶紫 0.002 中性紅 0.03 瓊脂 15.0 pH值7.4±0.1 25℃ |
酵母浸粉 3.0 蛋白腖 7.0 氯化鈉 5.0 葡萄糖 10.0 3號膽鹽 1.5 結晶紫 0.002 中性紅 0.03 瓊脂 12.0 pH值7.4±0.2 25℃ |
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成分區別 |
乳糖 |
葡萄糖 |
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原理 |
同 |
蛋白腖提供氮源，碳源，維生素和礦物質；酵母浸粉能夠提供微生物生長特別需要的B族維生素；氯化鈉可維持均衡的滲透壓；膽鹽和結晶紫能抑製樣品中的革蘭氏陽性菌；中性紅為指示劑；瓊脂是培養基的凝固劑。 |
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異 |
乳糖為唯一發酵底物 |
葡萄糖為唯一發酵底物 |
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培養條件 |
36℃±1℃培養18h～24h |
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質 控 菌 株 特 征 |
大腸 埃希 氏菌 |
紫紅色菌落，可有膽鹽沉澱環 |
紅色菌落，有膽鹽沉澱環 |
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弗氏 檸檬 酸杆 菌 |
紫紅色菌落，可有膽鹽沉澱環 |
紅色菌落，有膽鹽沉澱環 |
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陰溝腸杆菌 |
紫紅色菌落，可有膽鹽沉澱環 |
紅色菌落，有膽鹽沉澱環 |
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鼠傷 寒沙 門氏 菌 |
紅色菌落，無膽鹽沉澱環 |
紅色菌落，有膽鹽沉澱環 |
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福氏 誌賀 氏菌 |
紅色菌落，無膽鹽沉澱環 |
紅色菌落，有膽鹽沉澱環 |
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通過比較，我們可以看到兩種培養基的主要成分幾乎一模一樣：蛋白腖提供氮源、碳源、維生素和礦物質；酵母浸粉提供微生物生長特別需要的B族維生素；膽鹽和結晶紫能抑製樣品中的革蘭氏陽性菌；中性紅為指示劑；瓊脂是凝固劑。
兩者的區別在於糖類底物的差異：VRBA的底物是乳糖，而VRBGA的底物是葡萄糖。質控菌菌落特征有差別：不同的菌用兩種培養基傾注培養，形成的菌落特征會有差異（如表1、圖1、圖2）。
三、討論
通過上麵的比較，可以看出這是兩款不同用途的培養基，為了更好地理解這兩款培養基，首先要弄清“大腸菌群”和“腸杆菌科”這兩個概念。
有關大腸菌群，《GB 4789.3-2016 食品安全國家標準食品微生物學檢驗大腸菌群計數》中將其定義為“在一定培養條件下能發酵乳糖、產酸產氣的需氧和兼性厭氧革蘭氏陰性無芽胞杆菌”。“大腸菌群”並不是一個細菌分類學概念，也就是說，在正規分類學譜係中，是找不到“大腸菌群”這個定義的，普遍定義的大腸菌群通常包括以下幾個屬：腸杆菌屬（Enterobacter）、檸檬酸菌屬（Citrobacter）、埃希氏菌屬（Escherichia）、克雷伯氏菌數（Klebsiella）、哈夫尼亞菌屬（Hafnia）。
有關腸杆菌科，《GB 4789.3-2016 食品安全國家標準食品微生物學檢驗腸杆菌科檢驗》中是這樣定義的，“在給定條件下發酵葡萄糖產酸、氧化酶陰性的需氧或兼性厭氧革蘭氏陰性無芽胞杆菌”。腸肝菌科(Enterobacteriaceae family)是嚴格的細菌分類學定義，包括克羅諾菌屬（Cronobacter）、沙門氏菌屬（Salmonella）、腸杆菌屬（Enterobacter）、檸檬酸菌屬（Citrobacter）、埃希氏菌屬（Escherichia）、誌賀菌屬（Shigella）等等。
腸杆菌科與大腸菌群最大的區別在於，它不能在37°C下發酵乳糖，進而產酸或產氣。因此，像沙門氏、誌賀菌、變形杆菌等這些腸杆菌科中最重要的若幹門類都被排除在大腸菌群集群以外。
正是因為上麵所述的原因，VRBA（結晶紫中性紅膽鹽瓊脂）內含乳糖作為唯一糖類底物，專門用於檢測大腸菌群。典型大腸菌群細菌在VRBA上呈現紫紅色菌落，有時帶膽鹽沉澱環。非大腸菌群如沙門氏菌屬的菌落呈現紅色，無膽鹽沉澱環（如圖1）。當待測產品中本身含有乳糖以外的糖類時，這些糖類有可能伴隨進入培養酵解過程，導致非大腸菌群產生假陽性結果，這種情況需要對菌落進行進一步鑒定。
圖1 不同的菌種在VRBA上的生長特征
VRBGA（結晶紫中性紅膽鹽葡萄糖瓊脂）培養基的底物是葡萄糖，能支持各種腸杆菌科成員的普遍生長，典型腸杆菌科在VRBGA上呈現紅色菌落，帶膽鹽沉澱環（如圖2），但不能用來鑒別能酵解乳糖的菌屬和不能酵解乳糖的菌屬（如沙門氏）。
圖1 不同的菌種在VRBGA上的生長特征
基於上麵的區別和討論，實驗人員在使用這兩款培養基時，要加以區別，避免混淆。另外，大腸埃希氏菌E.coli是大腸菌群的代表菌屬，通常簡稱為大腸杆菌，還有些人對大腸杆菌、大腸菌群和糞大腸菌群這幾個概念也容易混淆。
相關知識可參考：大腸杆菌、大腸菌群、糞大腸菌群的定義與區分 點擊查看
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