一、用途及試驗原理:
該培養基用於O157選擇性增菌(ISO方法)。
胰酪蛋白腖和大豆蛋白腖提供碳源、氮源、維生素和生長因子;氯化鈉維持均衡的滲透壓;三號膽鹽和新生黴素可抑製革蘭氏陽性菌的生長;磷酸氫二鉀是培養基pH緩衝劑;葡萄糖作為可發酵的糖類。
添加劑:每瓶需配套添加6盒HB0106-1新生黴素4.5 mg使用。每支添加於225 mL的mTSB肉湯中。
二、培養基配方(g/L):
胰酪蛋白腖 |
17.0 |
大豆蛋白腖 |
3.0 |
氯化鈉 |
5.0 |
三號膽鹽 |
1.5 |
磷酸氫二鉀 |
4.0 |
葡萄糖 |
2.5 |
pH值7.3±0.2(25℃) |
三、試驗方法:
1. 稱取本品33.0g,加熱攪拌溶解於1000mL蒸餾水中,分裝每瓶225mL,121℃高壓滅菌15分鍾,冷至50℃左右時,加入1支新生黴素溶液(4.5mg),混勻,備用。
2. 10倍梯度稀釋法製備質控菌株菌懸液。
3. 選擇適宜稀釋度的菌懸液接種於培養基中。
4. 放置於41.5℃±0.5℃需氧培養18h-24h,觀察試驗結果。
四、試驗結果判斷:
接種以下質控菌株,放置於41.5℃±0.5℃需氧培養18h-24h,試驗結果如圖1所示。
質控菌株 |
菌株編號 |
接種量(CFU) |
生長情況 |
其他特征 |
大腸杆菌O157 |
ATCC 35150 |
10-100 |
+++ |
生長良好,渾濁 |
大腸埃希氏菌 |
ATCC 25922 |
10-100 |
+++ |
生長良好,渾濁 |
糞腸球菌 |
ATCC 29212 |
100-1000 |
- |
不生長,澄清 |
質控菌株接種量計數結果:
圖1 mTSB肉湯微生物質控結果
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