一、白色念珠菌簡介
白色念珠菌(Candida albicans)又叫白色假絲酵母,是一種雙相真菌,在培養基上生長通常呈現酵母相,菌落呈白色圓形凸起,具有酵母的香味,顯微鏡下觀察時菌體呈卵圓形,與一般的酵母菌無異,感染人體致病時一般呈現為菌絲相,菌體有細長菌絲芽管產生,可供菌體吸收營養和附著在人體組織表麵。
二、活化方法
培養基的選擇:白色念珠菌營養要求不高,通常使用沙氏葡萄糖瓊脂/液體培養基或馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養基進行活化,在營養瓊脂、TSA等細菌培養基上雖然也能生長,但較為緩慢,一般不常用。白色念珠菌在25-37℃培養均可生長,一般培養2-3天即可。
操作方法:若菌種為凍幹粉形式,按照說明書溶解後,可直接塗布或劃線至SDA/PDA平板上,也可加入至SDB/PDB等液體培養基中;若菌種為甘油凍存管形式,從冰箱中取出速融後,塗布或劃線至SDA/PDA平板上,也可加入至SDB/PDB等液體培養基中;若菌種為瓷珠形式,挑取瓷珠可轉入SDA/PDA平板上,也可加入至SDB/PDB等液體培養基中,20-25℃培養2-3天。
三、實驗室常用保存方法
1.斜麵保存法
將SDA或PDA培養基製成斜麵管,接種白色念珠菌後培養至菌落生長良好,置於2-8℃可保存1-3個月,超過3個月容易出現菌種老化、汙染、變異等現象,建議及時傳代。
2.脫脂牛奶/甘油/瓷珠冷凍保存法
可挑取非選擇性培養基上培養好的白色念珠菌至脫脂牛奶/液體/瓷珠菌種保存管中製成約108-109CFU/mL的菌液(瓷珠保存法需搖勻後棄菌液保留瓷珠),置於冰箱或液氮罐中冷凍保存,在-70℃以下可保存兩年以上,在-20℃也能很容易保存一年以上,白色念珠菌生命力強,很容易保存數年或數十年。
四、菌種的確認
1.菌落特征:白色念珠菌在平板上菌落呈現白色圓形凸起狀,具有酵母香味,在念珠菌顯色平板上呈綠色菌落。
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SDA平板 |
念珠菌顯色平板 |
3.芽管試驗:將白色念珠菌接種至吐溫80-玉米粉瓊脂上,20-25℃培養2-3天,挑取1環菌接種至兔血清,37℃培養2-3小時,鏡檢觀察,菌體可產生芽管。
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