一、試驗原理:
該培養基用於大腸埃希氏菌O157:H7/NM的選擇性增菌培養。
蛋白腖提供微生物生長所需的碳源、氮源、維生素和生長因子;乳糖為可發酵碳水化合物,可作為一種能量來源;3號膽鹽可抑製革蘭氏陽性菌的生長;氯化鈉維持均衡的滲透壓;結晶紫對革蘭氏陽性菌如葡萄球菌、白喉杆菌,以及綠膿杆菌、白念珠菌、表皮癬菌有殺滅作用,對其他革蘭氏陰性菌和抗酸菌幾乎無作用;中性紅為指示劑。
添加劑:每瓶需配套添加10盒HB8659a改良麥康凱肉湯添加劑使用,每200mL改良麥康凱肉湯添加1支添加劑。
二、培養基配方(g/L):
蛋白腖 |
20.0 |
乳糖 |
10.0 |
3號膽鹽 |
1.5 |
氯化鈉 |
5.0 |
中性紅 |
0.03 |
結晶紫 |
0.001 |
pH值7.2±0.1(25℃) |
三、試驗方法:
1. 稱取本品36.5g,加熱攪拌溶解於1000mL蒸餾水中,分裝三角瓶,每瓶200mL,121℃高壓滅菌15分鍾,冷卻45℃±1℃時,加入1支改良麥康凱肉湯添加劑,混勻,分裝無菌試管,每管9mL,備用。
2. 10倍梯度稀釋法製備質控菌株菌懸液。
3. 選擇適宜稀釋度的菌懸液接種於培養基中。
4. 放置於36℃±1℃需氧培養17h-19h,觀察試驗結果。
四、試驗結果判斷:
接種以下質控菌株,放置於36℃±1℃需氧培養17h-19h,試驗結果如圖1所示。
質控菌株 |
菌株編號 |
接種量 (CFU) |
參比或 計數培 養基 |
生長情況 |
其他特征 |
大腸杆O157 大腸埃希氏菌 金黃色葡萄球菌 |
ATCC 35150 ATCC 25922 ATCC 6538 |
10-100 1000-5000 1000-5000 |
TSA |
在CT-MAC上>10CFU |
菌落無色, 中心灰褐色 |
大腸埃希氏菌 |
ATCC 25922 |
1000-5000 |
TSA |
在TSA上<10CFU |
|
金黃色葡萄球菌 |
ATCC 6538 |
1000-5000 |
TSA |
在TSA上<10CFU |
|
圖1 改良麥康凱肉湯(CT-MAC)微生物質控結果
圖2 培養液接種的試驗結果
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