一、產品用途與試驗原理:
用於艱難梭菌選擇性分離培養。
蛋白腖、牛肉浸粉、酵母浸粉提供氮源、和生長因子;葡萄糖、果糖、可溶性澱粉提供碳源;碳酸氫鈉為酸堿緩衝劑;丙酮酸鈉和琥珀酸促進艱難梭菌的生長;L-精氨酸可以降低代謝產物對生長的抑製作用;L-半胱氨酸鹽酸鹽可以維持平皿的厭氧環境;焦磷酸鹽和氯化血紅素可以提供無機鹽離子;氯化鈉維持滲透壓;中性紅為酸堿指示劑;瓊脂是培養基的凝固劑;D-環絲氨酸和頭孢西丁為抑菌劑,頭孢西丁對除產氣莢膜梭菌外的梭菌幾乎無抑菌性;艱難梭菌不產生磷脂酶,卵黃乳液中含有卵磷脂,艱難梭菌不會產生沉澱環,以此區別目標菌與非目標菌。
二、培養基配方(g/L):
胰蛋白腖 |
10.0 |
牛肉浸粉 |
10.0 |
酵母浸粉 |
3.0 |
葡萄糖 |
1.0 |
可溶性澱粉 |
1.0 |
氯化鈉 |
5.0 |
碳酸氫鈉 |
0.4 |
丙酮酸鈉 |
1.0 |
L-半胱氨酸鹽酸鹽 |
0.5 |
L-精氨酸 |
1.0 |
焦磷酸鹽 |
0.25 |
果糖 |
6.0 |
琥珀酸 |
0.5 |
氯化血紅素 |
0.01 |
中性紅 |
0.03 |
瓊脂 |
13.5 |
pH7.0-7.4 25℃ |
三、試驗方法:
粉體裝培養基的使用:
1、稱取本品53.20g,加熱溶解於1000ml 蒸餾水中完全溶解,每瓶200ml,121℃滅菌15min,冷至 45-50℃時,每200ml培養基中加入50%卵黃乳液10ml,無菌環絲氨酸0.1g和無菌頭孢西丁3.2mg,混勻,傾入無菌平皿,備用。
2、準備質控菌液。接種準備好的平皿。
3、放置35℃厭氧培養48小時,記錄實驗結果。
四、結果觀察與解釋
接種以下質控菌株,放置35℃厭氧培養48小時,記錄實驗結果。
質控菌株 |
菌株編號 |
接種量(CFU) |
生長特征 |
其他特征 |
艱難梭菌 |
ATCC43593 |
/ |
生長良好 |
黃色菌落,無沉澱環 |
產氣莢膜梭菌 |
ATCC13124 |
/ |
抑製 |
/ |
艱難梭菌ATCC43593,黃色菌落,無沉澱環
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