一、產品用途及原理
用途:本培養基用於產氣莢膜梭菌確認試驗。
添加劑:每瓶需配套添加206盒HB8508-1a焦亞硫酸鈉溶液和206盒HB8508-1b檸檬酸鐵銨溶液使用,每8 mL乳糖亞硫酸鹽培養基(LS)需要1支焦亞硫酸鈉和1支檸檬酸鐵銨溶液。
原理:胰酪腖、酵母膏為微生物的生長提供碳氮源、維生素和生長因子;氯化鈉維持均衡的滲透壓;乳糖為可發酵的糖類,產氣莢膜梭菌可發酵乳糖產酸產氣;L-半胱氨酸鹽酸鹽能有效降低氧化還原電位,防止過氧化物的積累對某些菌產生毒性;焦亞硫酸鈉和檸檬酸鐵銨用於檢測硫化氫的產生,使菌落呈黑色。
二、培養基配方(g/L)
胰酪腖 |
15.0 |
酵母膏 |
2.5 |
氯化鈉 |
2.5 |
乳糖 |
10.0 |
L-半胱氨酸鹽酸鹽 |
0.3 |
pH值7.1±0.2(25℃) |
三、試驗方法
1、稱取本品30.3g,加熱溶解於1000mL蒸餾水中,分裝至含有倒置小導管的試管中,每管8mL,121℃高壓滅菌15分鍾,冷卻,臨用前,每管添加1支焦亞硫酸鈉溶液(0.5mL)和1支檸檬酸鐵銨溶液(0.5mL),當天使用。
2、製備質控菌液接種到培養基中。
3、放置於36℃±1℃厭氧培養18h-24h。
四、結果觀察
接種以下質控菌株,放置於36℃±1℃厭氧培養18h-24h。培養結果如圖1。
質控菌株 |
菌株編號 |
接種量(CFU) |
生長情況 |
其它特征 |
產氣莢膜梭菌 |
ATCC 13124 |
>5000 |
+++ |
變黑 |
圖1 乳糖亞硫酸鹽培養基(LS)的微生物質控結果
五、注意事項
1、使用時,需保證倒置的小導管中無氣泡,防止對產氣結果造成幹擾。
2、可通過滴加液體石蠟構造試管中的厭氧環境。
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